荷那龙罗非鱼两种胰岛素样生长因子基因igf-玉和igf-域的克隆.pdfVIP

Online system: http://www.j 业 生 物 技 术 学 报 Journal of Agricultural Biotechnology 2012, 20(2): 171~180 DOI: 10.3969/j .issn.1674-7968.2012.02.009 研究报告 Letter 荷那龙罗非鱼两种胰岛素样生长因子基因(IGF- 和IGF- 域) 的克隆、序列 分析及组织表达特征 * 高风英 卢迈新 黄樟翰 朱华平 可小丽 中国水产科学研究院珠江水产研究所 ，广州510380 ， * 通讯作 mx-lu@163.com 要 胰岛素样生长因子(insulin-like growth factors, IGFs)在鱼类的生长、发育过程中起重要作用。本研究 克隆了荷那龙罗非鱼(Oreochromis hornorum)两种胰岛素样生长因子(IGF)基因，并采用半定量RT-PCR 方法 检测了两种基因在不同组织中的表达情况。以荷那龙罗非鱼肝脏总RNA 为模板，RT-PCR 结合3RACE 与 ： 5RACE 法扩增IGF- 与IGF- 域的cDNA 。扩增片段插入pMD-T 载体并测序。序列分析表明 IGF- 总长1 305 bp ；IGF- 域总长1 091 bp 。其推测氨 酸序列都具有胰岛素样生长因子 因的典型特征结构，分别包括信 并具有 ， 号肽和B 、C、A 、D、E 5 个区域， 6 个保守的半胱氨酸，但它们之间推测氨 酸全序列的同源性较低 为26% 。正常生理条件下，两种IGF 在所有被检测组织中均有表达。IGF- 在肝脏、肌肉和性腺中表达量较 高，在肾脏中表达量最低；IGF- 域在肾、胃、肠、脾、垂体中表达量较高，在肌肉中表达量最低。在所有被检测组 ， 、脾、胃、肾和垂体中具有显著性差 织中 IGF- 域的表达量均高于IGF- 的表达量，但二 的表达量只有在肠 异(P0.05) 。雌雄个体中除脾、胃、肾、垂体外，IGF- 在雌性中的其它组织表达均低于雄性，其中雄性个体中 肌肉组织IGF- 的表达水平显著高于雌性个体 (P0.05) ；IGF- 域在雌雄个体相同组织间的表达水平比较差 异均不显著。本研究有助于进一步了解荷那龙罗非鱼的生长调节机制和更好地理解鱼类IGFs 的生理功能。 关键词 荷那龙罗非鱼，胰岛素样生长因子，克隆，RT-PCR ，组织表达 Cloning and Sequence of Two cDNAs Encoding Insulin-like Growth Factors and 域Genes (IGF- and IGF- 域) of Zanzibar Tilapia (Oreochromis hornorum) and Their Tissue Distribution GAO Feng-Ying LU Mai-Xin* HUANG Zhang-Han ZHU Hua-Ping KE Xiao-Li Pearl River Fishery Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Guangzhou 510380, China