吸烟对高密度脂蛋白抗氧化功能的作用.pdf

中文摘要 背景和目的 高密度脂蛋白(highdensity1．poprote．n，HDL)通过促进胆固醇逆转运、抗氧 化和抗炎症等功能，在抗动脉粥样硬化中发挥了重要的作用．在临床上，通过检 测血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)，间接反映人体循环血液中HDL的水平．人们 很早就发现，HDL-c的水平和冠心病风险负相关，并且将提高HDL-c水平作为抗动 脉粥样硬化治疗的靶标之一．然而最近的研究表明，HDL的功能在急性应激或慢 性炎症状态等条件下将被削弱甚至发生逆转．于是人们认识到，HDL的功能比水 平更重要． 脂质氧化是动脉粥样硬化起始的核心事件，通过诱导泡沫细胞生成和凋亡 而形成粥样斑块．吸烟是动脉粥样硬化的独立危险因素．大量研究表明，吸烟能 够使低密度脂蛋白胆固醇(LDL．C)的水平升高而使HDL-c水平降低，并且戒烟能够 使血脂成分改善．然而，人们对吸烟过程中HDL的功能变化尚不清楚．本研究的 目的，即针对既往无吸烟史和有长期吸烟史的健康人群，测定其在单次吸烟前后 HDL抗氧化功能的改变，并且尝试探寻其机制． 方法 1．收集20名无吸烟史和22名长期吸烟的健康受试者吸烟前后的血清样本，将 血样分成4组：无吸烟史组单次吸烟前、无吸烟史组单次吸烟后、长期吸烟 组单次吸烟前、长期吸烟组单次吸烟后，冻存于．80℃待用 2．通过密度梯度超速离心方法分离高密度脂蛋白，BcA法测定其浓度，琼脂糖 凝胶电泳鉴定其纯度 3．酶联免疫吸附法(ELlSA)检测HDL上淀粉样蛋白A(sAA)的含量 基础氧化程度：之后加入铜离子氧化，记录氧化曲线及各个参数，以氧化速 at 度达峰时间(t Vm。。)和最大0D值(ODm拟)分别评估LDL的氧化易感性和最终 氧化程度 5．将无吸烟史组单次吸烟前低密度脂蛋白等比例混合，作为正常态LDL(LDLp酬)． 先将各个受试者的HDL分别通过检测紫外光(波长234nm)下OD值，以评价 HDL基础氧化程度；再将其与LDL哪I等比例混合，加入铜离子氧化，记录氧 化曲线及各个参数，以迟滞时间(TI。g)和氧化速度达峰时间评估HDL抗氧化性 能 6．荧光法测定血清对氧磷酶．1(PON．1)活性 结果 S 1．无吸烟史组和长期吸烟组单次吸烟后心率升高(67．2±13．4对71．5±9．9， ±8．9对76．8±10．0，p0．01；70．8±8．0对74．2±7．5，0．01)． 2．长期吸烟组胆红素，无论是总胆红素或直接胆红素均较无吸烟史组明显降低 3．53±1．2l，p0．05)． 3．长期吸烟组单次吸烟后尿酸升高(273．7±56．9对323．8±49．4，p0．05)． p0．01)． 5．长期吸烟组LDL基础oD值，明显高于无吸烟史组及其单次吸烟后《0．209± 6．长期吸烟组LDL氧化速度达峰时间低于无吸烟史组及其单次吸烟后(52．5± 后最大OD值升高(0．580±o．162对o．707±0．118，p0．05)． 7．无吸烟史组或长期吸烟组单次吸烟后迟滞时间均有所下降(96．0±14．4对 组增大． 8．长期吸烟组氧化速度达峰时间高于无吸烟史组及其单次吸烟后(135．5±16．7 对145．4±14．0，p0．0S；128．1±17．7对145．4±14．0，p0．01)． 结论 1．单次吸烟后，无吸烟史者和长期吸烟者，其机体均处于急性应激状态． 2．长期吸烟者其机体处于慢性氧化状态，胆红素等内源性抗氧化物质被过度消 耗． 3．单次吸烟使无吸烟史者和长期吸烟者HDL抗氧化能力均出现降低． 4．长期吸烟者HDL抗LDL氧化能力，较无吸烟史者增高，但是仍然不能纠正长 期吸烟所导致的慢性氧化状态． s．长期吸烟者在急性应激时，HDL抗氧化性能降低更明显． 关键词吸烟急性期，长期吸烟，高密度脂蛋白，脂蛋白功能，抗氧化 6 ABSTRACT ANDO叫ECnVE BACKGROUND an roIeinanti-athemScIerosis