嗅鞘细胞的培养和其修复周围神经损伤的基础研究.pdfVIP

PIIllllll II 11111Ilfrll／11IIIJII Y1 嗅鞘细胞的培养及其修复周围神经损伤的基础研究 硕士生： 王纪坤 专 业： 外科学(骨科) 导 师： 魏开斌 教授 中文摘要 目的 cells，OECs)的分离与 探讨威年大鼠嗅鞘细胞(Olfactoryensheathing 纯化培养方法。并探讨嗅球成鞘细胞(OECs)移植对周围神经损伤后再生的 促进作用。 方法 取材后用差速贴壁和阿糖胞苷(arabinosyl 的．纯化培养方法培养嗅鞘细胞，分不同阶段进行观察，并行胶质纤维酸性蛋 fiberacidic factor 白(glial protein，GFAP)和神经生长因子受体(nervegrowth receptor 生理盐水组(阴性对照组)，嗅鞘细胞(OECs)组，甲钴胺组(阳性对照组)， 钳夹各组大鼠右侧坐骨神经制作坐骨神经损伤模型，用微量注射器分别于神 经损伤处注射药物，生理盐水组注射生理盐水1Oul，嗅鞘细胞组注入l Ogl细 胞悬液，甲钻胺(methylcobalamin)组注射甲钴胺10ul(0．5mg／m1)，彻底止 血后逐层关闭切口。分别于术后1周，2周，3周，4N，观察大鼠坐骨神经功 function 能指数(stifle index，SFI)，并于4周时处死大鼠，取小腿三头肌称 湿重，测量三头肌湿重恢复率。 结果 p 采用改良的Nash差速贴壁法培养嗅鞘细胞l天后，加入Ara．c5mol／L作 璃24，4召夺时，能够培养出足够数量且纯度较高的嗅鞘细胞。术后各组l周、2 凋、3周、4周坐骨神经指数均有恢复，但嗅鞘细胞(OECs)组及甲钴胺组指 数较生理盐水组恢复明显，差异有显著性意义(PO．O1)，嗅鞘细胞(OECs) 组与甲钴胺组指数差异无统计学意义。术后4N取小腿三头肌湿重，将损伤 0．0 1)，前两者之间差异无统计学意义。 结论 差速贴壁和Ara—c抑制相结合的纯化培养方法是一种简单经济而又有实 效的嗅鞘细胞培养方法。且培养的嗅球成鞘细胞对周围神经损伤后的神经功 能恢复有积极的促进作用。 关键词：嗅球；嗅鞘细胞；原代细胞培养；周围神经损伤；坐骨神经功能指 数；甲钴胺 2 、 STUDY ONREPAIROFADULTRAT PERIPHERALNERVE INJURYBY TRANSPLANTS0FOLFACTORY CELLS Jikun Author：Wang Speciality：Orthopaedicsurgery Kaibin Tutor：prof：Wei