土槿皮乙酸对肝癌BEL-7402细胞侵袭转移能力的作用.pdf

目 录 一、摘要 中文论著摘要………………………………………………………l 英文论著摘要………………………………………………………3 二、英文缩略语…………………………………………………………6 三、论文 前言…………………………………………………………………7刚舌…………………………………………………………………7 材料与方法…………………………………………………………8 结果…………………………………………………………………10 讨论·····································································．．．．．．14 结论…………………………………………………………………15 四、本研究创新性自我评价……………………………………………16 五、参考文献……………………………………………………………17 六、附录 综述…………………………………………………………………19 在学期间科研成绩…………………………………………………25 致谢…………………………………………………………………26 个人简介……………………………………………………………27 ·中文论著摘要· 土槿皮乙酸对肝癌BEL-7402细胞侵袭转移能力的 影响 目的 土槿皮乙酸(pseudorlaric Gord)的根皮及近根皮中分离出来的二萜类化合物，为一种单体成分。 Kaempferi 土槿皮乙酸传统上是作为一种抗真菌药物，后来发现其具有抗生育、抗血管生成和 抗肿瘤作用。研究证明PAB可以抑制胃癌‰引、肺癌、肝癌‘4—1、宫颈癌∞’71白血病Ⅲ 等多种肿瘤细胞的增殖并诱导细胞凋亡，其作用机制可能与清除氧自由基，作用于 响与肿瘤发生密切相关的细胞信号传导通路等有关。虽然近年来，多项实验对PAB 抗肿瘤的作用机制进行了一定的研究，而且土槿皮乙酸对肝癌细胞增殖和凋亡H一3 确实有影响，但尚未发现有关PAB对肝癌侵袭转移作用的报道，本实验将探讨研究 土槿皮乙酸对人肝癌BEL一7402细胞株侵袭转移能力的影响。，以为进一步开发治疗 肝癌的新药提供试验依据。 方法 1．细胞培养 人肝癌细胞株BEL．7402由中国医科大学附属盛京医院传染科实验室惠赠，在 含10％胎牛血清的RPMI1640培养液、饱和湿度，饱和温度为37C，C02浓度为5％ 的培养箱中培养。 2．MTT比色法检测细胞增殖 100tJl。培养12小时后分别加入含不同浓度PAB的培养液，分别培养24，48，72h， 应用MTT比色法检测各孔吸光度值(0D值)，计算细胞生长抑制率。 3．Transwel 1检测PAB对BEL一7402细胞侵袭能力的影响 la 数生长期的细胞用于实验，打匀的细胞悬液加入Transwell小室，同时加入0．5 作为趋化条件，小室内为含l％血清的培养基，下室为含30％血清的培养基。常规 培养24小时后予甲醇固定，姬姆萨染色，取膜，封片，镜检。细胞计数，倒置显 微镜下随机选取5个视野(400术)计数细胞个数，取均数。 4．Transwel l检测PAB对BEL一7402细胞迁移能力的影响 Transwell侵袭实验。 5．统计学方法 采用SPSSl3．0统计软件，计量资料以z+S表示，采用t检验。 结果 1．PAB对BEL一7402细胞增殖的影响 不同浓度PAB(0．5，1．0，2．0，4．O)作用相同时间，随着药物浓度的增加，对细 胞生长的抑制率增加，相同浓度PAB作用不同时间(24，48，72h)，随着时问的增加， 对细胞生长的抑制率增加。表现出明显的剂量依赖性和时问依赖性(PO．05)，0．5 lamol·L．1PAB作用24小时，对细胞生长