食品安全与卫生检测及解读.docVIP

食品安全与卫生检测 实训教学指导书 （食品加工技术专业、食品安全监测专业） 吉林粮食高等专科学校 2004年6月 《食品安全与卫生检测》实训指导书 依据《食品安全与卫生检测》课程教学大纲的要求，结合我校的实际情况，编写本指导书，作这《食品安全与卫生检测》任课教师教学参考和食品工程专业教学用书。全书共分10个实训专题，建议教学学时为30～50学时。 《食品安全与卫生检测》是在学过分析化学、食品生物化学是一门应用科学。主要讲通过本课程各教学环节，要求学生掌握了解国内外科学技术动向因此，本课程承担着培养专业专门人才和提高技术的双重任务。改革实验教学内容，减少演示性、验证性实验，增加工艺性、设计性、综合性实验，逐步形成基本实践能力与操作技能、综合实践能力与综合技能有机结合的实践教学体系。构建具有专业特色的实验、生产、、毕业实习”实践教学。　　 　　　　（3－1） 式中：X —— 样品中AFTB1的含量，μg/kg； V1 —— 稀释前样液的体积，ml； V2 —— 出现同样最低荧光强度时滴加样液的点样量，μl； D —— 样液的总稀释倍数； m —— 稀释前相当样品的质量，g； 0.0004 —— AFTB1的最低检出量，μg。 注意事项 1．本法的灵敏度较高，容易产生误差。如薄层板制作不平整、不均匀，点样的间距太小等都会产生误差。 2．AFTB1标准储备液应密封于具塞试管中，在4oc冰箱中避光保存。如果在保存期间体积明显减少，应及时补充溶剂。使用前，应对其测定标准液的浓度。 3．AFT是一种剧毒和强致癌性物质，因此，在使用时特别注意其安全保护。如实验时应佩戴口罩，配标液时应戴乳胶手套。如被标液污染时应及时用50g/L次氯酸钠溶液浸泡消毒。实验结束后应做好清洗消毒工作，对于剩余的AFT标液以及呈阳性样液，应先用50g/L次氯酸钠处理后方可倒在指定的地方。实验所用玻璃器皿消毒后再进行清洗（用50g/L次氯酸那浸泡5min）。 实训二、食品中N－亚硝胺化合物的检测 一、目的 1、熟练掌握食品中N-亚硝胺化合物的测定原理。 2、掌握食品中N-亚硝胺化合物的测定方法。 二、测定原理 本法是测定食品中挥发性N－亚硝胺总量的方法。 食品中挥发性亚硝胺经水蒸气蒸馏纯化后，经过紫外光照射，分解释放为亚硝酸根。然后利用强碱性离子交换树脂浓缩，在酸性条件下与对位氨基苯磺酸形成重氮盐，最后与N－萘乙烯二胺二盐酸盐形成红色偶氮染料。颜色的深浅与N－亚硝胺的含量成正比。 三、试剂 1．0.1mol/L磷酸缓冲溶液（PH7）：分别吸取0.1mol/L磷酸氢二钠（Na2HPO4）61.9ml和0.1mol/L磷酸氢二钠（NaH2PO4）39.0ml，将两者混合而成缓冲溶液。 2．300g/L醋酸溶液 3．0.5mol/L氢氧化钠溶液 4．1.7mol/L盐酸溶液 5．100μg/ml二乙基亚硝胺标准溶液 6．100μg/ml亚硝酸钠标准溶液 7．1mol/L氢氧化钠溶液：用正丁醇饱和 8．10g/L硫酸锌溶液 9．强碱性离子交换树脂：交链度8，粒度150目。 10．显色剂： 显色剂A――10g/L对位氨基苯磺酸的300g/L醋酸溶液 显色剂B――2g/LN－1－萘乙烯二胺二盐酸盐的300g/L醋酸溶液 显色剂C――10g/L对位氨基苯磺酸的1.7mol/L盐酸溶液 显色剂D――10g/L　N－1－萘乙烯二胺二盐酸盐溶液 四、仪器和用具 分光光度计、紫外灯：BR－69盘形杀菌灯（10W）。 五、操作方法 1．亚硝胺标准曲线绘制 准确吸取亚硝胺标准溶液0.0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10ml，分别放入小培养皿中，在小培养皿中分别加入PH7的磷酸缓冲溶液，使溶液的总体积为2.0ml，摇匀。在紫外光下照1min。然后依次加入0.5ml显色剂A，摇匀，再加入0.5ml显色剂B，使溶液呈玫瑰红色后，分别在550nm波长下用分光光度计测定其吸光度，然后绘制其标准曲线。 2．样品的制备 液体样品：称取10.0－20.0g样品（根据样品中亚硝胺的含量大小称量），移入100ml容量瓶中，加入0.5mol/L氢氧化钠溶液，调整其浓度为1mol/L，摇匀后过滤，收集滤液备用。 固体样品：将固体样品捣碎或研磨搅拌均匀，称取20.0g，用正丁醇饱和过的1mol/L氢氧化钠溶液将其转移入100ml容量瓶中至刻度，摇匀后浸泡过夜，最后离心取清液备用。 3．挥发性N－亚硝胺总量的测定 吸取样品50ml清液置于蒸馏瓶内，将其进行夹层保温水蒸气蒸馏，收集馏出液25ml，用300g/L醋酸溶液调节其PH值至3－4。再继续蒸馏，再收集馏出液25ml，用0.5mol/L氢氧化钠调至PH7－8。在紫外光下照射15min，通过强碱性离子（氯离子型）交换柱（φ1cm×0