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微生物第7章 - 1
代时与倍增时间的测定方法 二分裂殖单细胞微生物的生长曲线纵坐标上选择指数期内细胞数量为倍数关系的两点,其对应横坐标两点之差为代时; 非二分裂殖火丝状微生物在生长曲线纵坐标上取生物量为倍数关系的两点对应的时间差为倍增时间; N0 : 初始细胞量;Nt : t 时间的细胞量; n : 从0~t 时间内繁殖的代数 二分裂殖单细胞微生物代时的计算公式 G = ———— tt – t0 tt – t0 n = ———————— 3.322(logNt-logN0) 微生物在确定培养条件下的代时(倍增时间) Vibrio natriegens 柱胞鱼腥藻 桃褐腐病菌 巢状组囊藻 比生长速率( m ):在确定培养条件下,在微生物指数生长期,单位生物量单位时间内的增加量为常数,或细胞瞬时增长量与此时细胞量的比值是一个常数,表征各种微生物的生长速率: dN/dt = m N (m的单位:mg/mg·h=h-) lnNt-lnN0= m (tt-t0) logNt-logN0= m (tt-t0) / 2.303 μ=(logNt-logN0)×2.303 / (tt-t0 ) 比生长速率(m)的计算 ∵ G=(tt-t0)/3.322(logNt-logN0) m =(logNt-logN0)×2.303/(tt-t0) ∴ G=2.303/3.322 m G =0.693/m 在指数生长期,比生长速率达到最大且稳定;代时(倍增时间)最短且稳定; 某种微生物的比生长速率或代时,决定于生长的营养与环境条件,是可以控制的; 代时或倍增时间与比生长速率的换算关系 稳定期持续时间的延长 生长到达稳定期后,营养物质浓度降低程度、有毒代谢废物的积累量、环境恶化程度决定稳定期的长短; 在发酵工业中,生产次级代谢产物需要尽量延长稳定期,以便达到最高发酵单位; 一般采用补充营养物,移出部分代谢产物的半连续或连续发酵方式,以及控制pH值,提高通气量等方式延长稳定期; 培养到稳定期时达到了最大生物量,以湿重或干重g/L表征;影响最大生物量的主要因素是培养基中营养物的浓度; 生物量(g) 碳源消耗量(g、mol) Y= 稳定期的最大生物量与生长得率 生长得率(Y):消耗单位量的营养物质(碳源)所获得的生物量;好氧菌一般Y值约为0.20~0.50; 限制性营养物浓度与m与最大生物量的关系 限制性营养物:生长必需的某种营养物(碳源、氮源、生长)在培养基中限量提供,也称为生长限制性因子; 限制性营养物浓度与最大生长量呈线性关系;与比生长速率呈双曲线关系; 在工业发酵生产中,或者生理代谢研究中,需要将微生物的生长维持在指数生长期;通常用连续培养的方式达到这一目的; 连续培养:在培养过程中,连续流加营养物质,同时连续移出代谢产物的恒定培养液体积的开放培养方式: 7.1.5 维持稳定生长的方法 稀释率(D):营养物质的流加速率与培养液体积的比率;或单位时间内单位培养液体积的流加量; D=f / v 单位:h-1 f:培养液流加速率(mL/h); v:培养液体积(mL) 恒化培养:控制稀释率而维持培养液中限制性营养物的浓度恒定; 恒浊培养:控制稀释率而维持培养液浊度恒定; 连续培养的控制参数—稀释率(D) 稀释率与生长参数的关系 * 第七章 微生物的生长及其控制 第一节 微生物生长规律 第二节 影响微生物生长的环境因素 第三节 微生物生长的控制方法 第一节 微生物的生长规律 7.1.1 微生物的培养与群体生长 7.1.2 生物量测定方法 7.1.3 微生物的生长规律 7.1.4 生长参数和生长过程控制 7.1.5 维持稳定生长的方法 微生物的培养:在实验室或在工业上,使用培养基与培养容器,在特定培养工艺和培养条件下,人工培养微生物,获得微生物菌体或代谢产物的过程; 在培养过程中,微生物的个体生长表现为细胞组分的均衡增加,细胞形态略有增大; 微生物的繁殖导致个体数量或生物量有规律的增长,表现为群体的生长;群体生长与培养条件(培养基和环境因素)密切相关; 7.1.1 微生物培养与群体生长 在人工培养条件下培养微生物,通过繁殖而得到的微生物群体称为培养物(culture); 只有一种微生物的培养物,或者由单个细胞繁殖得到的微生物群体,称为纯培养物(pure culture),简称纯培养; 微生物的实验室培养与工业发酵,一般都是纯培养; 微生物由于个体微小,很容易混杂,需要经常性的进行菌种纯化,以获得微生物的纯培养; 微生物的纯培养 平板单菌落分离法:使微生物的单细胞或单孢子充分分散,
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