炎症通过NF-κBPP2Ac信号通路促进胰腺癌转移的机制探究.pdfVIP

2 3 炎症通过NF-κB/PP2Ac信号通路促进胰腺癌转移的机制研究 中文摘要 炎症通过NF- κB/PP2Ac信号通路促进 胰腺癌转移的机制研究 中文摘要 目的：炎症在胰腺癌进展中扮演着了重要角色。有研究发现，在炎症刺激下，抑 2A proteinphosphatase2A PP2A 癌基因蛋白磷酸酶 （ ， ）表达被抑制。然而，炎症是 否通过抑制PP2A参与了胰腺癌的进展尚未得到证实。本实验探讨炎症在促进胰腺癌 转移中信号通路核因子kappaB(nuclearfactorkappaB,NF-B)/PP2Ac 的作用。 方法： 1. 采用脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）处理胰腺癌细胞，建立体外炎症模型 2. dibutyltindichloride DBTC C57BL/6 采用二丁基二氯化锡（ ， ）处理 小鼠，建 立小鼠慢性胰腺炎模型 3. Realtime-PCR Westernblot PP2A 通过 ， 检测炎症对体外、体内模型中 催化性 C亚基（PP2Acatalyticsubunit，PP2Ac）表达的影响 4. 通过液相蛋白芯片和荧光素酶报告基因检测LPS对胰腺癌细胞NF-κB通路的 激活作用 5. 通过Westernblot检测LPS对胰腺癌细胞激酶信号通路的激活作用 6. 通过MTT检测LPS对胰腺癌细胞增殖能力的影响 7. 通过Transwell检测LPS对胰腺癌细胞侵袭力的影响。 结果:LPS可显著抑制胰腺癌细胞PP2Ac 的表达，在小鼠慢性胰腺炎模型中胰腺 组织PP2Ac亦呈低表达。NF-B通路为炎症反应中至关重要的信号转导通路，LPS 可导致IKK持续磷酸化、IκBα磷酸化和降解，以及p65入核，激活胰腺癌细胞NF-B 通路。分别用IKKα显性负性突变体（dominantnegativeIKKα，DN-IKKα）、IκBα显 DN-IκBα Bay 11-7082 IκBα EF-24 IKK 性负性突变体 （ ）、 （ 抑制剂）、 （ 抑制剂）阻断  NF- B通路，削弱了LPS对胰腺癌细胞PP2Ac 的抑制作用，说明LPS抑制胰腺癌细 胞PP2Ac 的表达是通过NF-B通路依赖性途径。同时荧光素酶报告基因证实LPS通 I 中文摘要 炎症通过NF-κB/PP2Ac信号通路促进胰腺癌转移的机制研究  过NF- B通路依赖性途径抑制PP2Ac 的转录。进一步研究发现，LPS通过抑制PP2Ac 的表达激活胰腺癌细胞JNK、ERK、Akt、PKC激酶信号通路。另外，细胞生物学行 为研究显示LPS对胰腺癌细胞生长没有影响，但通过PP2Ac依赖性途径促进胰腺癌 细胞侵袭。 LPS NF-κB PP2Ac 结论： 通过 信号通路依赖性机制抑制 的表达，促进胰腺癌演 进。我们的研究为炎症驱动肿瘤进展提供了新的思路。