肿瘤细胞TRAIL-R1翻译后修饰及TRAIL-诱导凋亡的敏感性.pdfVIP

英文论著摘要……………………………………………………………………．．5 二、英文缩略语……………………………………………………………………．．10 三、论文 论文一 前言………………………………………………………………………………………………………．1月U舌………………………………………………………………………………………………………．11l 方法和材料………………………………………………………………………12 结果………………………………………………………………………………………………………．14j：Cj木………………………………………………………………………………………………………．1‘} 论文二 前言………………………………………………………………………………………………………．1日U吾………………………………………………………………………………………………………．19一 方法和材料……………………………………………………………………．．20 结果………………………………………………………………………………………………………．21 讨论………………………………………………………………………………………………………．：!zI 结论………………………………………………………………………………………………………．26 四、本研究创新性的自我评价……………………………………………………．．28 五、参考文献………………………………………………………………………．．29 六、附录 综述………………………………………………………………………………………………………．32 在学期间科研成绩………………………………………………………………47 致谢………………………………………………………………………………………………………．48 个人简历………………………………………………………………………．．49 ·中文论著摘要· 肿瘤细胞TRAIL．R1翻译后修饰和TRAIL． 凋亡的敏感性 目 的 提取出9种特异性结合人类TRAIL．R1的人免疫球蛋白G的单克隆抗体，并分类这 9种TRAIL．R1特异性单克隆抗体，筛查抗体在TRAIL．R1相对应的表位。迸一步， 筛选对TRAIL治疗敏感性较高的肿瘤细胞类型和TRAIL治疗肿瘤较有效的细胞 提供有用资料。 方法 种肿瘤细胞上继续分类和筛查TRAIL．R1特异性单克隆抗体在TRAIL．R1上的可 能抗体表位。迸一步用细胞生存能力分析，筛选TRAIL．R1抗体表位(TRl．272．、 438．和419．表位1，并选择对于细胞凋亡作用最强的TRAIL．R1抗体表位。接着， 激光共聚焦显微镜分析和验证，所筛选的TRAIL．R1抗体表位在TRAIL结合之后 eDNA序列表达情况，检 可能发生的变化。进一步分析，各个细胞系TRAIL．R1 测各个细胞系TRAIL．R1的表达差异是否是因为各个细胞系TRAIL．R1碱基序列 抑制肿瘤细胞合成O．糖链，继续用流式细胞术分析各个细胞系抑制TRAIL．R1糖 U-检验估计P值。 链后的细胞染色结果。我们用Mann-Whimey’s 么士 里 二日 木 和422．抗体，TRl-412和438．抗体之间，完全阻断、部分阻断或几乎不阻断等特 点分析，推测出在重组体TRAIL．R1至少存在5种抗体表位。我们暂时将这些 和438．表位是相互远离的。而抗体结合TRl．416．、417．和438．表位，较少相互干 们用流式细胞仪分析各个抗体在不同细胞系的结合情况。有趣的是，部分细胞系 或438．抗体染色。这些结果证明，根据竞争ELISA结果分类抗体，符合细胞结合 模式分类，在各个细胞系细胞表面TRAIL．R1抗体表位表达是不同的。TRl-416 和417．表位在所有细胞系表达，表达TRl．416和417．表位的细胞系，不一定表达 不表达TRl．272表位，而强烈表达其他抗体表位。(4)进一步，我们检测不同