维生素E琥珀酸酯对人食管癌Eca-109细胞株的体外作用和其机制研究.pdfVIP

目 录 中文摘要 …………………………………………………………………1 英文摘要 …………………………………………………………………4 研究论文 维生素E琥珀酸酯对人食管癌Eca．109细胞株的体外作用及 其机制研究 前言刖舌 …………………………………………………………………8一………………………………………………………………… 材料与方法…………………………………………………………8 结果 ………………………………………………………．j．13 附图 …………………………………………………17 附表 …………………………．．、．……………………26 讨论 …………………………………………………28 结论 …………………………………………………33 参考文献 ……………………………………………33 7 综述维生素E琥珀酸酯对胃癌抑制作用的研究进展…………………3 致谢 ………………………………………………………………………44 个人简历…………………………………………………………………45 维生素E琥珀酸酯对人食管癌Eca．109细胞株的体外作用及其 机制研究 摘 要 E VE Succinate； 目的：通过体外实验研究维生素E琥珀酸fl旨(Vitamin S或称d一仅．生育酚琥珀酸酯)对人食管癌Eca．109细胞株增殖、凋亡以及相 关蛋白表达的影响，进一步探讨VES抑制食管癌细胞的作用机制，为食管 癌治疗及化学预防提供理论依据。 方法： 1体外培养人食管癌细胞Eca．109，采用四甲基偶氮唑蓝 (tetrzolium．basedcolorimetric 用于该细胞24、48、72h后抑制率的变化；应用普通光学显微镜和透射电 子显微镜观察细胞的形态学变化。应用流式细胞术(flow 响。 3采用流式细胞术(flow 结果： 1 细胞24．72h后，与对照组相比，各处理组OD值均有不同程度下降，差 随着VES处理浓度的增加、作用时间的延长，OD值逐渐下降，抑制率逐 渐升高，以8099／ml 珀酸酯对Eca．109细胞的增殖抑制作用呈明显的时间一剂量依赖效应。光 学显微镜下观察未经维生素E琥珀酸酯处理的Eca．109细胞呈贴壁生长， 细胞呈圆形、椭圆形或多边形。细胞透明，形态饱满，生长状态良好。而 经维生素E琥珀酸酯处理48h后的Eca-109细胞变圆，皱缩，呈不规则形， 中文摘要 细胞胞浆中出现空泡，脱落细胞数量明显增加。并且随着VES浓度的增加， 凋亡细胞数目也随之增加。经Giemsa染色光学显微镜下显示，对照组 Eca．109细胞呈菱形或多边形，形态饱满，细胞核染色均匀，核仁清晰可 胞变圆，胞质浓缩，核着色不均匀，出现核分裂现象，呈现凋亡细胞的形 态学改变。在透射电镜下观察，正常Eca．109细胞形态较大，呈椭圆形， 胞膜完整，表面有大量绒毛样突起。细胞核大，呈椭圆形，核内常染色质 丰富、均匀分散，密度一致。细胞质内细胞器丰富，可见内质网、线粒体、 胞呈现不同程度凋亡改变：细胞体积缩小，微绒毛减少，胞质浓缩，胞浆 中出现较多空泡，线粒体脊和膜部分或大部分融合消失，粗面内质网有脱 颗粒现象，胞核局部向外呈锐角突起，核染色质电子密度增高，边集于核 膜下，形成沿核膜的新月体状，有的出现核固缩。 琥珀酸酯浓度增大而逐渐升高，凋亡百分率分别为：14．1470／挂0．147％、 21．1 pO．05)。 照HIS值法进行免疫组化评分。 颗粒，颗粒粗大；药物处理组细胞随药物浓度增加，染色强度逐渐减弱， 颜色变淡，颗粒变细，阳性细胞数逐渐减少。评分统计后VES处理各组 弱阳性；药物处理组细胞随药物浓度增加，染色强度明显增强