胃癌中CD40信号调节髓源性抑制细胞(MDSC)生物学功能的探究.pdfVIP

胃癌中 CD40 信号调节髓源性抑制细胞(MDSC)生物学功能的研究 中文摘要 胃癌中 CD40 信号调节髓源性抑制细胞(MDSC) 生物学功能的研究 中文摘要 胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，占消化道肿瘤的 50%～60%，病死率居各类 恶性肿瘤之首，5 年生存率只有 30% 。近年来发病率明显上升，而且越来越年轻化， 但因早期症状不明显 ，缺乏特异性的初筛指标，多数患者在就诊时已经处于进展期， 传统根治手术及放化疗对进展期胃癌的疗效不理想 。因此，迫切需要新的治疗方法。 免疫治疗是目前的研究热点，启动和建立有效免疫应答正成为肿瘤治疗的新希望。 目前众多研究发现一些协同刺激分子在多种肿瘤中异常表达。CD40/CD40L 是介 导特异性免疫应答的一对极其重要的共刺激分子。CD40 表达于淋巴系统的恶性细胞， 包括几乎所有的 B 细胞恶性肿瘤， 以及许多实体瘤，例如膀胱癌，肾癌，胰腺癌，胃 癌，乳腺癌，大肠癌，肺癌等。临床研究表明 CD40 的表达与肿瘤的进展和转移有密 切关联 。肿瘤细胞协同刺激分子的表达改变，包括正性协同刺激分子表达的下降或者 突变，以及负性协同刺激分子的异常高表达，导致 T 细胞的凋亡及功能抑制，参与了 肿瘤免疫逃逸 。而肿瘤免疫逃逸通常与髓源性抑制细胞 （myeloid derived su ressor cell ，MDSC ）的聚集和调节性 T 细胞 （Regulatory T cell ，Treg ）的增多相关。Treg 在维持免疫耐受和破坏抗肿瘤反应中扮演重要角色 。MDSC 通过诱导活化的 T 细胞 产生凋亡、释放抑制性细胞因子、诱导 Treg 的产生以及与 NK 细胞和 Treg 细胞等形 成复杂的网络而产生负向调控功能。其抑制作用主要与精氨酸酶 1(arginase-1，ARG1) 和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitrieoxidesyntnase，iNos)有关 。已有研究表明 MDSC 可通过抑制 T 细胞免疫反应以及扩增 Treg 发挥其免疫抑制功能的。本研究以 CD40 为切入点，探讨其对 MDSC 生物学功能的调控作用及相关机制，为认识 MDSC 在免 疫逃逸中的作用提供有价值的线索 。 I 中文摘要 胃癌中 CD40 信号调节髓源性抑制细胞(MDSC)生物学功能的研究 第一部分 ：小鼠胃癌模型中 MDSC 上 CD40 的表达 及其与肿瘤进展的关系 目的目的：检测 CD40 分别在荷瘤小鼠脾脏来源和肿瘤浸润的 MDSC 上的表达水平， 目的目的 分析其表达在胃癌进展过程中可能的作用。 方法方法：利用小鼠胃癌细胞系 MFC 皮下注射 C57BL/6j 构建小鼠胃癌模型。随着 方法方法 肿瘤进展，每隔 5 天脱颈处死 3 模型 鼠，剥离肿瘤和脾脏，通过流式细胞术检测肿 瘤不同进展阶段脾脏及肿瘤浸润组织中 MDSC 比例及其表面 CD40 表达情况，统计 学分析其表达的意义。 结果结果：与正常小鼠脾脏 MDSC 相 比，荷瘤小鼠脾脏来源的 MDSC 表面 CD40 的 结果结果 表达 明显上升 （P = 0.0024 ）；脾脏MDSC 以及肿瘤组织浸润 MDSC 比例随着肿瘤生 长逐渐增高；MDSC 上 CD40 表达水平随肿瘤进展逐渐降低后稳定至一定水平。此外， 我们尚发现 WildeType (WT)小鼠大约在 5～6 天成瘤，而 CD40-/-小鼠约在 7 天后成瘤， 肿瘤生长速度和大小明显小于 WT 小鼠。随着肿瘤进展，WT 小鼠肿瘤浸润性 MDSC 的累积水平明显高于 CD40-/- 小鼠。上述结果提示，在小鼠胃癌模型中 ，肿瘤相关 MDSC 表面共刺激分子 CD40 高表达，且与