siRNA在治疗学中的应用.doc

siRNA在治疗学中的应用 生理科学进展2006年第37卷第4期 siRNA在治疗学中的应用术 梅林李学军 (北京大学第三临床医学院,北京大学医学部基础医学院药理学系,北京100083) 摘要小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)是外源性双链RNA(doublestrandRNA,dsRNA) 的加工产物,在细胞内能介导RNA干扰(RNAinterference,RNAi)效应,识别特异性mRNA,沉默同 源基因表达.其特异性和高效性显示出很高的实用价值,siRNA已成为许多疾病潜在的治疗手段. 对于siRNA的应用,尽管还需要在减少非特异反应,发掘高效递药载体,应对新的基因变异等方面 进行深入研究,但其可望在抗病毒,神经系统疾病和肿瘤治疗等许多领域发挥治疗作用. 关键词RNA干扰;小干扰RNA;基因治疗 中图分类号Q344 TheApplicationofsiRNAinTherapeuticsMEILin.,LIXue—Jun(.PekingUniversitytheThirdHos— pital,DepartmentPharmacology,PekingUniveni~HealthScienceCenter,Beijing100083,China) AbstractSmallinterferingRNA(siRNA)istheprocessingproductofexogenousdoublestrandRNA (dsRNA).siRNAmediatetheRNAinterference(RNAi),inducethedegradationofendogenousmRNA withhomologyshowinghighspecificityandthusgenerateexcitedpotentialoftherapeuticapplication.A1? thoughtheobstaclesincludingreducenon—specificeffect,establishhi【gh—efficientdeliverysystemandfa— cingthenewmutationareneededtoharnessed,recentpreclinicalstudiessuggestthatsiRNAholdgreat promiseforthe~eatmentofvariousdiseases. KeywordsRNAi;siRNA;genetherapy RNA干扰(RNAinterference,RNAi)作为一种 转录后基因沉默机制,从1998年首次报道双链 RNA(doublestrandRNA,dsRNA)可以特异性地沉 默基因表达以来,已经在各个领域广泛应用.外源 性dsRNA进人细胞后在Dicer酶(RNAasellI样核 酶)的作用下生成2l一23nt的小干扰RNA(small interferingRNA,siRNA),siRNA在ATP参与下被 RNA解旋酶解旋成单链,其中反义链与相应蛋白可 以识别互补的mRNA,并在核酸内切酶的作用下切 割靶mRNA,最后再被核酸外切酶进一步降解,从而 干扰基因表达. 一 ,RNAi在抗病毒治疗中的应用 病毒感染占人类难以治愈疾病中的相当大一部 分.病毒可以将自身遗传物质整合到宿主细胞核, 使一般药物难以直接发挥作用.由于siRNA可以 介导沉默病毒相关基因,而且其高特异性对宿主细 胞其他功能影响较小,所以RNAi很可能成为最后 攻克病毒的工具之一.目前的研究主要集中在沉默 病毒特定基因,抑制病毒复制,抑制病毒重要蛋白的 合成或沉默介导病毒入胞的细胞受体,从而干扰病 毒的侵袭作用,以达到预防病毒感染的目的. 人免疫缺陷病毒(humanimmuno—defficiencyvi— mS,my)是严重危害人类健康的逆转录病毒,其基 因组包括结构基因gag,env和pol,调控蛋白tat和 rev,附属蛋白nef和vif,以及病毒复制所必须的长 末端重复序列(1ongterminalrepeats,LTR).Novina 等…发现,转染针对CD4受体合成的siRNA能使 HIV一1感染Magi—CCR5细胞的能力降低75%,沉默 gag能使p24表达下降75%,nef—siRNA则能使nef 转录产物减少为原水平的10%,p24水平下降为原 水平的4%.这些实验都能大大降低游离病毒水 平,可见RNAi沉默基因表达的强大效力.Jacque 等应用针对LTR,vif和nef基因的siRNA使 CD4Hela细胞内病毒复制下降95%以上.他们在 实验中发现,如果siRNA有1个碱基(nt)与靶 国家自然科学基金资助课题 通讯作者