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远程缺血预处理提高梗死后心肌募集移植干细胞能力的实验探究
目录
中文摘要……………………………………………………………………………1
英文摘要……………………………………………………………………………．3
引 言……………………………………………………………………………5
第一部分…远程缺血预处理对梗死后心肌SDF．1表达的影响……………．．14
1．前言……………………………………………………………………………．．14
2．材料与方法……………………………………………………………………．．15
2．1实验动物………………………………………………………………………．15
2．2主要实验试剂…………………………………………………………………15
2．3主要实验设备……………………………………………………………．16
2．4动物模型………………………………………………………………………．17
2．5酶联免疫吸附检测血清细胞因子……………………………………………19
2．6聚合酶联反应检测SDF-1的转录表达……………………………………．2l
2．7免疫印迹检测SDF．1的蛋白表达………………………………………25
2．8统计分析方法………………………………………………………………．30
3．结果…………………………………………………………………………………3l
3．1实验模型结果…………………………………………………………………．31
3．2远程缺血预处理后血清中细胞因子早期升高………………………………．31
3．3远程缺血预处理后心肌SDF-1基因转录晚期升高………………………．．32
3．4远程缺血预处理后心肌SDF-1蛋白表达晚期升高…………………………．33
4．讨论………………………………………………………………………………．．34
5．结论……………………………………………………………………………………36
6．参考文献……………………………………………………………………………．．37
第二部分…远程缺血预处理提高梗死后心肌募集移植干细胞的疗效研究………。40
1．前言……………………………………………………………………………．．40
2．材料与方法…………………………………………………………………………42
2．1实验动物……………………………………………………………………．．42
2．2主要实验设备………………………………………………………………．42
2．3骨髓间充质干细胞的分离、培养、鉴定…………………………………．．43
2．4骨髓间充质干细胞的标记及计数…………………………………………．44
2．5移植实验……………………………………………………………………．．46
2．6SDF．1／CXCR4阻断实验………………………………………………．．46
2．7免疫组化检测心脏中移植细胞……………………………………………47
2．8定量PCR检测心脏中移植细胞……………………………………………50
2．9左心室功能检测……………………………………………………………．．51
2．10统计分析方法…………………………………………………………．．52
3．结果……………………………………………………………………………．．53
3．1骨髓阅充质干细胞的表面抗原表达鉴定结果…………………………53
3．2骨髓问充质干细胞染色后计数结果……………………………………．53
3．3远程缺血预处理提高移植细胞在心内滞留率的免疫组化结果…………．．54
3．4远程缺血预处理提高移植细胞在心内滞留率的PCR检测结果…………．．55
3．5远程缺血预处理提高细胞移植治疗梗死心脏左室功能的结果……………57
3．6阻断SDF-1降低远程缺血预处理提高的细胞滞留率……………………．58
4．讨论…………………………………………………………………………………S9
5．结论…………………………………………………………………………………62
6．参考文献……………………………………………………………………………63
第三部分…文献综述………………………………………………………………68
综述l：基质细胞衍化因子．1在心梗治疗中的作用及意义………………………．．68
综述2：缺血处理在心脏保护中的研究．及应用………………………………………91
附录1：缩略词列表…………………………………………………………………111
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