银杏叶提取物对小鼠黑素瘤B16细胞的增殖及凋亡的影响.pdfVIP

目 录 中文摘要…………………………………………………………………．．1 英文摘要…………………………………………………………………．．4 英文缩写…………………………………………………………………．．8 研究论文银杏叶提取物对小鼠黑素瘤B16细胞增殖和凋亡的影响 —1上．—j一 日Ⅱ舌…………………………………………………………………一9 材料与方法…………………………………………………………．．10 结果…………………………………………………………………．．16 附图…………………………………………………………………．．18 附表…………………………………………………………………．．23 讨论…………………………………………………………………．．25 结论…………………………………………………………………．．28 参考文献……………………………………………………………．．29 综述银杏叶提取物的研究现状及应用………………………………．．33 致谢………………………………………………………………………．．47 个人简历…………………………………………………………………．．48 万方数据 中文摘要 银杏叶提取物对小鼠黑素瘤B16细胞增殖和凋亡的影响 摘 要 目的：近年来由于中药研究的不断发展，银杏受到多数研究学者的重 视，并对其叶、花、果及外种皮等进行了不同程度的药理学研究，其对银 杏叶提取物(ginkgobiloba 银杏叶提取物，含24％的黄酮(主要是橡黄素、山萘酚和异鼠李素)和 酯)，它们是EGB中最重要的活性物质，其他的组分还包括原花青素、葡 萄糖、鼠李糖、有机酸、D．糖质酸和白果酸。目前，EGB制剂已作为一种 治疗药物广泛应用于一些心血管和神经性功能障碍的疾病。近年来，很多 研究证明EGB有一定的抗肿瘤作用，还有放射增敏效果，同时，并不增加 正常组织的急性放射性损伤，但EGB抗黑色素瘤的研究鲜有报告，且作用 机制尚不清楚。恶性黑素瘤(malignant 肿瘤，多发生于皮肤，国外统计占所有恶性肿瘤的1％～2％，在癌症死 亡病例中，MM约占1％。且发病率有逐年上升的趋势。其转移早而广泛， 而且对手术、放化疗效果欠佳，且副作用大，是一种临床治疗上颇为棘手 的恶性肿瘤。有研究发现，EGB抑制肿瘤增殖及诱导凋亡，降低肿瘤细胞 及提高CaspaSe．3的活性，阻滞肿瘤细胞进入分裂期，促进细胞凋亡。因 此，EGB抗肿瘤的活性的机制便成为人们研究的热点之一，但EGB对恶性 黑素瘤B16细胞的作用目前尚未见报道。 响，来分析其对黑素瘤细胞的作用机理，为银杏叶提取物诱导肿瘤细胞凋 亡的基础研究及临床应用提供实验依据。 方法： 1细胞培养 将小鼠黑色素瘤B16细胞培养于含10％n台牛血清的 箱内进行常规传代培养。 2该实验分为对照组(药物浓度为Omg／L)及不同浓度银杏叶提取物 万方数据 中文摘要 (20mg／L、40mg／L、80mg／L、160 mg／L、320mg／L)继续培养48dx时后， 药物对细胞增殖活力的影响，计算相应浓度抑制率及IC50。 3倒置显微镜观察不同浓度EGB处理前及处理48小时后对B16细胞 的细胞形态学观察并拍照。 4采用PI染色法用流式细胞仪对B16细胞进行细胞周期分析。 析。 况。 差异具有显著统计学意义。 结果： 1药物作用前的B16细胞呈多角形或菱形，贴壁生长，大小一致， 均匀分布，增殖旺盛，未见固缩现象伊ig．1)。 2MTT结果显示，EGB对小鼠黑素瘤B16细胞具有增殖抑制作用， 比较，差异均具有统计学意义俨O．05)；相对抑制率(％)：25．18、34．67、 50．65、53．99、58．64(Table