银杏黄酮对顺铂所致卵巢功能损伤的保护作用的实验探究.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………一l 英文摘要……………………………………………………………………”5 研究论文银杏黄酮对顺铂所致卵巢功能损伤的保护作用的实验研究 前言………………………………………………………………………………………·9日U吾………………………………………………………………………………………。9 材料与方法…………………………………………………………··10 结果……………………………。………………………………………………………·14 附图………………………………………………………………………一17 附表………………………………………………………………………………………·19 讨论………………………………………………………………………………………·22 结论………………………………………………………………………………………·24 参考文献………………………………………………………………24 综述化疗所致卵巢功能损伤的保护作用的研究进展…………………·29 致谢………………………：．．…………………………………………………………………·35 个人简历……………………………………………………………………36 _ 中文摘要 银杏黄酮对顺铂所致卵巢功能损伤的保护作用的实验研究 摘 要 CDDP所作用的卵巢颗粒细胞的生长影响。化学发光法测定各组细胞上清 液中的雌激素水平，分别测定不同浓度的GBE对CDDP所作用的卵巢颗 讨GBE对CDDP所致卵巢功能损伤的保护作用。 方法： 1研究对象 不同浓度的GBE)。 1．2对照组：只含有卵巢颗粒细胞不添加任何处理因素的阳性对照组。 础体温双相，生殖激素水平在正常范围内且无多囊卵巢综合征及子宫内膜 异位症，近6个月无服用激素类药物及免疫抑制类药物。 排除：子宫肌瘤、乳腺癌、子宫内膜癌等其它妇科肿瘤；内分泌、免 疫及代谢性疾病；高血压、心脏病、肾病等内科疾病等。按促性腺释放激 素激动剂／促卵泡激素／人绒毛膜促性腺激素长周期方案诱发排卵。 2标本采集 收集阴道B超引导下后穹窿穿刺抽吸双侧卵巢的卵泡液于试管中， 即刻送实验室进行培养。 3实验方法 3．1细胞培养 卵泡液经离心、漂洗、分离、消化。接种于6孔培养板中，加入含 未贴壁细胞及红细胞，继续培养，倒置显微镜下观察细胞形态变化及生长 中文摘要 状况。 24h镜下观察，细胞长满90％板壁时，吸去培养基，Hands液冲洗， 弃去未贴壁细胞和红细胞。0．25％胰蛋白酶室温下消化，镜下观察细胞收 缩变圆时，加入Hands液终止消化，继续培养。 3．2CDDP对颗粒细胞生长影响的MTT实验 48h后酶联免疫检测仪测定细胞吸光度值(OD值)，计算细胞抑制率，取 细胞抑制率达30％以上的CDDP浓度10ug／ml，为以下实验做准备。‘ 3．3CDDP与不同浓度的GBE合用对颗粒细胞生长影响的MTT实验 CDDP与不同浓度的GBE分别同时加入，每一浓度设3个复孔，并 设空白组，培养48h测定OD值。 3．4收集细胞培养48h后的细胞上清液，并收集吸去上清液后的颗粒细胞， 化学发光法测定各组细胞上清液中的雌激素水平。 3．5将上述收集的颗粒细胞按照SOD、MDA试剂盒要求取上清液测定各 管OD值，BCA法测定各组细胞中蛋白的含量，计算细胞中SOD活力、 MDA含量。 结果： 1细胞生长情况 颗粒细胞经台盼蓝染色测定细胞活性90％以上。 倒置显微镜下观察，接种细胞呈圆形，6h后即开始贴壁，24h后基本贴壁 完全并开始生长。 2药物对颗粒细胞的生长影响 2．1CDDP对颗粒细胞生长的影响 CDDP对颗粒细胞生长的抑制作用呈剂量依赖性即CDDP浓度越大 OD值越小。随着药物浓度的增加，对细胞的抑制作用逐渐增强，。 2．2 CDDP与不同浓度的GBE合用对颗粒细胞的生长影响 CDDP+GBEl 计学意义。 中文摘要 随着GBE浓度的增加，对细胞的抑制作用逐渐减弱。