锌缺乏通过线粒体途径诱导MC3T3-E1细胞凋亡的探究.pdfVIP

·中文论著摘要· 锌缺乏通过线粒体途径诱导MC3T3-E1细胞凋亡的研究 目 的 骨质疏松症是指单位体积骨量减少伴有骨强度的降低，在目前世界的常见病、 多发病中居第7位。骨质疏松所导致的骨折等并发症可导致残疾、死亡，治疗耗 资大，给患者、家庭和社会带来沉重的负担。锌作为人与动物生长过程中的一个 必不可少的微量营养元素，在骨骼的生长、发育和维持正常骨量中都起到了重要 的作用，锌缺乏是导致骨质疏松的重要因素之一。骨质疏松主要与骨形成和骨吸 收的动态平衡破坏相关。其中成骨细胞的数量和活性决定了骨形成水平，从而影 响骨量。凋亡作为细胞生理、病理的最终阶段，成骨细胞的凋亡在骨质疏松当中 起到了重要的作用。本实验通过检测线粒体相关凋亡途径，探讨锌缺乏时成骨细 胞凋亡的机制。 方法 常规培养和传代鼠成骨细胞系MC3T3．E1细胞，取对数生长期的细胞，锌离 子螯合剂TPEN制造锌缺乏模型，MTT法检测细胞增殖，并确立合适的TPEN浓 度。实验分为四组：正常组：细胞正常培养不加处理因素；TPEN组：培养基中 加入终浓度味5 gM lxM的TPEN，不加锌离子；锌缺乏组：培养基中加入终浓度5 的TPEN和1 lxM的锌离子；锌充足组：培养基中加入终浓度5IxM的TPEN和15 流式检测线粒体膜电位，提取线粒体蛋白，Westernblot检测线粒体中Bax蛋白表 达水平，以及细胞质中AIF、cytochrome C的线粒体释放。采用SPSS17．1统计学 免疫荧光检测细胞内AIF和cytochrome 软件进行统计学分析。数据采用Xq-s表示，多组间差异显著性选用单因素方差分 析多组间比较，组间比较选用SNK方法，P0．05表明具有统计学意义。 结 果 h的IC50分别为3．32 gM。与正常组和锌充足组相比，TPEN组和锌 gM和2．18 缺乏组，细胞凋亡明显增加，线粒体膜电位显著降低，线粒体内Bax蛋白表达增 加，细胞质中AIF和eytochromec表达增加，AIF和eytochromeC由线粒体释放 组、TPEN组和锌缺乏组无明显差异。 结 论 锌缺乏可以引起Bax线粒体易位，从而降低线粒体膜电位，通过Caspase依赖 性和Caspase非依赖性线粒体凋亡途径诱导成骨细胞凋亡。 关键词 锌缺乏；成骨细胞；线粒体凋亡途径；Caspase依赖性途径；Caspase非依赖 性途径 2 ·英文论著摘要· Cell InducedZinc in Apoptosisby Deficiency 1 OsteoblasticMC3T3．ECellsviaa Mitochondrial--mediated Pathway eetive Obj referstotheunitvolumeofbonelossassociatedwithbone Osteoporosis strength reduction rowsthe7thincommon can leadto O