高效离心分配色谱分离纯化根皮苷及其氧化制备黄色素的的分析研究.pdfVIP

● L 摘要 根皮苷是根皮素的葡萄糖苷，属于植物黄酮类中的二氢查尔酮苷，它广泛存在于 多种植物组织中，其中苹果的树枝、叶以及苹果果实中提取含量尤其高，曾一度被认 为是苹果中的特征性物质。 本研究首先建立了一种快速测定苹果树枝、叶中根皮苷含量的RP．HPLC检测方 法。色谱条件为Waters Symmetry 98．95％，RSD为1．22％，说明该方法准确可靠。 然后以苹果树枝为原料，使用乙醇溶剂从中提取根皮昔，并采用HPLC法测定提 取液中根皮苷的含量。在单因素试验的基础上，通过正交实验设计进行工艺参数优化。 结果表明，对苹果树枝中根皮苷提取效果影响的大小顺序为：液料比、提取温度、乙 醇浓度、提取时间：其最佳提取工艺为：液料比20mL／g，提取温度70℃，乙醇浓度 为60％，提取时间为90rain。在此优化工艺条件下，根皮苷的提取含量为39．2 mg／g。 为了获得高纯度的根皮苷，运用高效离心分配色谱技术对苹果树枝乙醇提取物中 的根皮苷进行分离纯化。通过对两相溶剂体系、转子转速和流动相流速等参数进行系 统的优化实验，得到了满意的分离效果。结果表明：最佳两相溶剂系统为正己烷．乙 酸乙酯．甲醇．水f1：5：1：5，v／v)，上相有机相为固定相，下相水相为流动相，转子转速 为1500 rpm，流速为3．0 内，从纯度为17．91％苹果树枝乙醇提取物中一步分离纯化得到根皮苷，高效液相色 谱法测定其纯度为91．20％，根皮苷的回收率为98．10％。 』 采用多酚氧化酶(PPO)对根皮苷进行酶法合成根皮苷氧化产物(POP)，氧化动力学 p 产物的具体途径是：首先根皮苷几乎全部转变为无色中间体(POPl)，然后在没有任何 副反应下转变为黄色素(POP2)。 关键词：根皮苷，苹果树枝，高效离心分配色谱，分离纯化，黄色素 Abstract Phloridzinis tothe in glucosidephloretin，itbelongsdihydrochalconeglycosideplant ina of in andthe flavonoids，presentvarietyplanttissues，especiallyapplebranches，leaves ithas to extractof beenusedconsidered硒thesubstancein fruit，even apple typical apple fruit． A for methoddetermination reversed-phasehig