第三章 均相酶反应兜寞力学.ppt

生化工程;第三章 均相酶催化反应动力学; 实例： 脂肪酶催化酯化反应：生物柴油 油料 甘油+脂肪酸;化学反应的基础知识;反应速率及其测定;反应分子数;反应级数; 反应分子数和反应级数对简单的基元反应来说是一致的，但对某些反应来说是不一致的。例如：;酶促反应动力学基础——反应速率;二级反应 A+B C;酶促反应动力学基础 —— 平衡常数;酶的基本概念;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;酶与底物的作用机理;Induced-Fit Model;酶促反应动力学基础;酶反应动力学;单底物酶促反应动力学;快速平衡学说 对于单底物的酶促反应：;反应体系中酶量守恒：;当反应初始时刻，底物[S][E]，几乎所有的酶都与底物结合成复合物[ES]，因此[E0] ≈[ES]，反应速率最大，此时产物的最大合成速率为：;稳态学说;当反应系统中[ES]的生成速率与分解速率相等时，[ES]浓度保持不变的状态成为稳态。;由于[S][E0]，所以[S][ES]，[S]-[ES]≈[S];(9);Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;快速平衡学说与稳态学说在动力学方程形式上是一致的，但Km和Ks表示的意义是不同的。 当k+2k-1时，Km=Ks这意味着生成产物的速率远远慢于[ES]复合物解离的速率。这对于许多酶反应也是正确的。;底物浓度与反应速率的关系;反应速率、底物浓度与时间的关系;米氏常数Km的意义？;问 题;动力学参数的求解;L-B双倒数法;积分法;例1：如果要求反应速度达到Vmax的99%，求其底物浓度。解：;例3 有一均相酶催化反应，Km值为2×10-3mol/L，当底物的初始浓度[S0]为1×10-5mol/L时，若反应进行1min，则有2%的底物转化为产物。试求出：（1）当反应进行3min ，底物转化为产物的百分数是多少？此时底物和产物的浓度分别为多少？（2）当[S0]为1×10-6mol/L时，也反应了3min，底物和产物的浓度是多少？（3）最大反应速率Vmax值为多少？解：（1 ）根据题意， [S0]＜0.01 Km， 所以V= Vmax[S0]/ Km=-ds/dt即，ln([S0]/[S])= Vmax/Kmt反应进行1min时，[S]=（1-2%）×[S0]=0.98×10-5mol/L∴ Vmax/Km=0.0202 min-1反应进行3min 时， ln([S0]/[S])= 0.0202×3=0.0606∴ [S]=0.94×10-5mol/L，XS=6%……;抑制剂对酶促反应速率的影响;竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制;竞争性抑制(competitive inhibitions) ;利用快速平衡假说:;The net effect of competitive inhibitions is an increased value of with reduced reaction rate, but same maximum reaction rate.;非竞争性抑制(Non-competitive Inhibitions);With similar equations and derivations as before, ;The net effect of non-competitive inhibitions is a reduction in with same Michaelis-Menten constant.;反竞争性抑制(Uncompetitive Inhibitions);With similar equations and derivatives as before, ;Plots on Uncompetitive Inhibitions;各种抑制的比较;例 在含有相同酶浓度的五个反应物系中，分别加入不同浓度的底物，并测定其初始速率，然后再在同样五个反应物系中分别加入浓度为2.2×10-1mmol/L的抑制剂，并测其初始的反应速率，其数据见下表。;解：将上述实验数据分别取其倒数，以1/v-1/[S]作图，得到下图的两条直线，他们在纵轴上有一共同点，这表明该抑制为竞争性抑制。;Vmax=1/0.