致病菌细胞的近红外的光谱鉴别方法研究-演示文稿.pptVIP

致病菌细胞的近红外光谱鉴别方法研究;立题意义;试验方法;结果分析;2、单增李斯特菌的分离培养结果 取出改良的MC Bride琼脂（MMA）平板，斜光照射，可以看出菌落为灰蓝或蓝色、小的圆形菌落。挑取几个发育良好的孤立菌落接种于三糖铁（TSI）琼脂和SIM动力培养基，培养于25℃的恒温培养箱中，观察到有动力，且呈伞状或月牙状生长的菌落。这是单增李斯特菌的典型菌落。接种到（TSA—YE）试管斜面上放在冰箱中保存，以备下一步试验用。;3、 沙门氏菌的生长曲线;培养时间（h）;②、生长曲线图;③、从生长曲线图，可以看出0-5h为沙门氏菌的延缓期，5-16h为对数生长期，16h以后逐渐进入稳定期和衰亡期。符合典型细菌生长曲线四个时期的划分。本实验选16h为沙门氏菌的培养时间，进行下一步的试验。;4、沙门氏菌、单增李斯特菌的鉴别;②单增李斯特菌不同浓度全细胞、细胞壁、细胞质的光谱叠加图;③ 沙门氏菌、单增李斯特菌全细胞的鉴别分析;从图中可以看出，PCA分析可以良好的反映出沙门氏菌、单增李斯特菌全细胞的差异性信息。沙门氏菌第一组分得分范围在-0.05～0.03之间，第二组分得分范围在-0.13～-0.02之间；单增李斯特菌第一组分得分范围在-0.09～0.04之间，第二组分得分范围在0.01～0.25之间。可见两种菌的第一主分得分范围几乎完全相同，而第二主分得分范围明显不同。 不同的细菌，其细胞的物质组成是不一样的。不同的物质在经过近红外光照射后会在不同的波段产生红外特异性吸收，且有着不同的吸收谱段，因此可以通过近红外光谱法区分开来。;④沙门氏菌、单增李斯特菌细胞壁的鉴别分析;从图中可以看出，PCA分析可以良好的反映出沙门氏菌、单增李斯特菌细胞壁的差异性信息。沙门氏菌第一组分得分范围在-0.10～0.05之间，第二组分得分范围在-0.02～0.15之间；单增李斯特菌第一组分得分范围在0.05～0.28之间，第二组分得分范围在-0.30～-0.02之间。可见两种菌的第一主分和第二主分得分范围完全不同。 沙门氏菌为革兰氏阴性菌，单增李斯特氏菌为革兰氏阳性菌。革兰氏阴性菌的细胞壁除了肽聚糖还含有外膜，包括脂多糖、脂质双层、脂蛋白三部分；革兰氏阳性菌除了肽聚糖还含有大量磷壁酸。其细胞壁组分不相同，不同的物质在经过近红外光照射后会在不同的波段产生红外特异性吸收，且有着不同的吸收谱段，因此可以通过近红外光谱法区分开来。 ;⑤沙门氏菌、单增李斯特菌细胞质的鉴别分析;从图中可以看出，PCA分析可以良好的反映出沙门氏菌、单增李斯特菌细胞质的差异性信息。沙门氏菌第一组分得分范围在0.04～0.12之间，第二组分得分范围在-0.22～-0.10之间；单增李斯特菌第一组分得分范围在0.02～0.06之间，第二组分得分范围在-0.03～0.12之间。两种菌的第一主分得分范围有相似的地方，第二主分得分范围明显不同。 细菌的细胞质是指被细胞膜包围的除核区以外的一切半透明、胶体状、颗粒状物质的总称，主要成分为核糖体、贮藏物、各种酶类、中间代谢物、质粒、各种营养物质和大分子的单体等。两种不同的细菌其细胞质组成也不同，所以可以通过近红外光谱法区分开来 。;总结;3、根据不同浓度梯度的沙门氏菌、单增李斯特菌的全细胞、细胞壁和细胞质的近红外光谱，利用基于主成分分析技术的投影判别分析，可以将沙门氏菌和单增李斯特菌区分开来。 4、近红外光谱分析技术可以用于沙门氏菌、单增李斯特菌的分类鉴别。为建立一种快速???致病菌检测方法提供依据。 ;5、但是，到底是什么物质引起近红外光产生特异性吸收还不知道，尚需进一步研究，利用近红外光谱分析技术对更多种类致病菌的检测技术也需要进一步研究。 ;讲解完毕！