遗传学篇 6.pptVIP

请注意菌落的数量！ 五、转导（transduction） 指以噬菌体为媒介，将细菌的小片段染色体或基因从一个细菌转移到另一个细菌的过程。 1、普遍性转导（generalized transduction） 供体细菌基因组的很多不同部分都可以转导到受体细菌中的现象。噬菌体的遗传物质并不直接参与转导过程。 普遍性转导的“错误装配”机制 转导噬菌体 转导子 完全缺陷 噬菌体 一个以上的基因同时被转导的现象称为共转导。由于转导的片段较短，一般少于3个基因。 如果两个基因紧密连锁，其共转导频率就大。利用转导形成的部分二倍体，可以测定细菌基因间的连锁关系。 P1 phage 感染 供体细胞 thr+leu+azir 释放子代噬菌体，其中有转导噬菌体 受体细胞 thr-leu-azis 感染 在受体中选择一个或几个供体的标记基因，再检定非选择标记基因的有或没有 选择标记 非选择标记 leu+ 50% azir ,2% thr+ thr+ 3% leu+ ,0% azir thr+leu+ 0% azir thr、leu、azi的连锁关系： thr leu azi 受体菌经转导获得的供体DNA片段在受体菌中不发生交换和整合，也不迅速消失，而只是进行转录和翻译（性状表达），这种现象就称为流产转导。 流产转导 特点：在选择培养基平板上形成微小菌落。 产生? phage 的裂解物 侵染K12各种非溶源的突变体的培养物 分析K12(?)野生型（供体）细胞的任何一个野生型等位基因是否已经被转移到已溶源化的突变的受体细胞中 U.V诱导 野生型K12(?) 涂布在各种选择培养基上，观察菌落数 以温和噬菌体为媒介，将供体细菌染色体的特定部分转移给受体细菌的过程。 噬菌体DNA直接参与了转导过程。 2、局限性转导（restricted transduction） 也称做特异性转导（specialized transduction ） E.coli 部分染色体 ?dgal部分缺陷转导噬菌体具有完整的?外壳，能感染细菌；大约丢失了25%的噬菌体DNA，不能自我复制。 原噬菌体异常切离（10-5）宿主染色体 ? dgal转导噬菌体 ? dbio转导噬菌体 多数情况：流产转导 + gal- λdgal+ λdgal+ gal- 极少数情况： 基因重组 少数情况： λdgal+整合 六、细菌遗传重组的途径 1、接合（conjugation） 2、转导（transduction） 3、转化（transformation） 游离的细菌DNA片断被吸收到细菌的细胞内。 部分二倍体中F-细菌的完整基因组称为内基因子（endogenote），供体部分基因组称为外基因子（exogenote）。 ?细菌的重组在部分二倍体中进行。 A B b a 供体染色体片段 F-细胞染色体 A B b a b a A B A B b a A B b a + A B b a 部分二倍体 ?只有偶数次交换才能产生平衡的重组子; ?选择培养时只出现一种重组子，相反的重组子不出现。 与真核生物相比，细菌重组的其他特点？ ?细菌基因重组的方式为非减数分裂式的，包括接合、转化与转导三种途径。 2、重组作图 利用Hfr菌与F-菌株杂交后，在部分二倍体中，若两基因相距越近，在重组体中同时出现的机会越多；两基因相距越远，在重组体中同时出现的机会越少。 根据重组体中某一性状单独出现的频率作为两基因间的交换率，就可以进行基因定位。 Hfr：lac+ade+ strs F- ：lac-ade- strr 在含有str的基本培养基上培养选择ade+ strr的重组子 Hfr ? F- 混合培养60min 再在EMB培养基上选择哪些ade+ strr的重组子为lac+ ，哪些为lac- lac-ade间发生交换 l- a+ sr l+ a+ a- l- sr ss l+ a+ a- l- ss sr 部分二倍体 lac-ade间未发生交换 l+ a+ a- l- sr l+ a+ sr = 交换型重组体数 交换型重组体数+未交换型重组体数 ?100% = lac- ade+ (lac+ ade+) + (lac- ade+) ?100% 请注意与计算真核生物重组值的区别 某一性状单独出现的菌落数 重组体总菌落数 ?100% 两基因间 的交换率 = 五、性导 带有部分细菌染色体的F因子。 F总能在同一地点整合到细菌的染色体上，回复到Hfr状态 。 1、F因子 F因子 2、性导（sexduction or F-duction） 利用F 因子将供体细胞的基因导入受体形