Aptamer介导载紫杉醇PEG-PLGA纳米递释系统的构建及其抗肿瘤分析研究.pdfVIP

Aptamer介导载紫杉醇PEG．PLGA纳米递释系统的构建 及抗肿瘤研究 专业：药剂学 研究生：郭剑伟 导师：饶光玲、陈钧(复旦)、王永林 摘要 ㈣盟㈣垫眦4㈣∞ 目的：构建aptamer介导的载紫杉醇聚乳耐乙醇酸．聚乙二醇共聚物(PEG．PLGA) 纳米粒靶向递释系统，研究其对实验性鼠胶质瘤的抗癌效果。 方法：通过荧光显微镜观察验证a陋吼er与大鼠脑胶质瘤细胞的亲和性。采用碳 二亚胺法合成了PLGA．PEG共聚物并进行氢核磁共振谱表征。采用乳化／溶剂挥 发法制备了载紫杉醇的PLGA-PEG纳米粒，l，7,L9(34)正交试验筛选最优制备方 法，采用碳二亚胺法将aptamer连接到纳米粒表面，并用聚丙烯酰胺凝胶电泳进 行验证，并对其作了粒径、电性和体外释放度表征。采用噻唑蓝比色法测定了紫 杉醇注射剂、纳米粒和aptamer修饰纳米粒对太鼠脑胶质瘤细胞的毒性。采用液 相色谱．质谱联用方法测定紫杉醇注射剂、纳米粒和aptarner修饰纳米粒在大鼠体 内的药物动力学参数。采用尾静脉注射多剂量重复给药，以肿瘤生长抑制实验和 生存期评价紫杉醇注射剂、纳米粒和印tarner修饰纳米粒的抗肿瘤作用。 结果：aptamer-与C6的亲和随着aptamer浓度的增高(0．05、0．25和1．25pmol·pIq) 步反应时间分别为4和12h合成的PLGA．PEG共聚物数均分子量约为22，800，PEG W，时间30Sec，投药量 连接率为25％，产率44％。最优制备方法为超声功率180 2％，胆酸钠，总体积12 nm，电位为．23．70mV，包 mI，得到的纳米粒强度粒径112 封率为49．6％，在PH7．4磷酸盐缓冲液和空白血浆中紫杉醇从纳米粒中的释放相 似，24 h有45％的药量突释，之后缓慢释放。约有70％的印t锄er连接到纳米粒表 nln，电位为．32．93 面，形成g／aptamer{ff饰纳米粒粒径为156 mV，在PH7．4磷酸 盐缓冲液和空白血浆中的体外释放度与不修饰纳米粒没有显著性差异。细胞存活 h时ap切me穆饰纳米粒的半数抑制 (24、48和96h)的延长而降低。24、48和96 浓度IC50分别是注射剂的2．59、4．18和4．67倍，是纳米粒的2．92、3．32和2．67倍。 紫杉醇注射剂、纳米粒和apt锄er修饰纳米粒在大鼠血浆中的消除半衰期tl，2B分别 为1．79、5．43和4．16 长体积,aptamer修饰纳米粒组纳米粒组注射剂组生理盐水组，20天时肿瘤体积 结论：aptamer介导的载紫杉醇PEG．PLGA纳米粒递释系统，对鼠胶质瘤的治疗效 果比注射剂和不修饰纳米粒有显著性提高，可为抗肿瘤药物的靶向治疗的研究提 供实验方法和相关理论。 关键词：Aptamer．紫杉醇，纳米粒，PLGA—PEG。靶向翻剞，药物传递系统。 肿瘤治疗 万方数据 HⅡ吾 随着纳米技术在药剂学领域的发展，当前纳米递释载体与靶向功能分子的结 合可能成为发展更高选择性和有效性的治疗和诊断模式，它能够提高无数重要疾 病的期望结果，包括癌症。通过专门设计的载体局部或全身给药，肿瘤靶向性药 物的递释可能获得成功，这就是通过连接在载体上的靶向功能基与肿瘤细胞上表 达的目标分子或抗原等特异性结合而实现【Il。癌症是目前世界上严重威胁人类健 康的最主要疾病之一，研究各种抗癌药物及其制剂是当前国内外医学和药学领域 的热点和难点。在各种治疗