金杰——高同型半胱氨酸血症中西医研究进展.pptVIP

高同型半胱氨酸血症中西医研究进展 金 杰 河南中医学院第一附属医院 * 河南中医学院一附院 第一部分 高同型半胱氨酸血症的现代研究 同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）是蛋氨酸的代谢产物。 高同型半胱氨酸血症作为缺血性卒中的新的危险因素，已经写进《2005 年中国脑血管病防治指南》。 发现Hcy 1960年，美国哈佛大学教授Kilmer McCully博士发现：在小儿较为少见的高半胱氨酸尿症患者中，都无一例外地发展成动脉硬化，于是他提出：高半胱氨酸可直接作用于动脉组织造成损害。 甲基化途径 转硫化途径 直接释放入细胞外基质内 Hcy的代谢途径 甲基化途径： 肝脏 其它组织 甜菜碱 甜菜碱同型半胱氨酸甲基转移酶(MTHFR) 5,10亚甲基4-氢叶酸还原酶 蛋氨酸 5-甲基4-氢叶酸 蛋氨酸合成酶 维生素B12 转硫化途径： 硫酸盐经尿排出体外 胱硫醚β-合成酶(CBS) 维生素B6 Hcy 丝氨酸 胱硫醚 γ-胱硫醚酶 半胱氨酸 α-丁酮酸盐 直接释放入细胞外基质内: 有研究表明，Hcy的 排出与蛋氨酸浓度有关，蛋氨酸浓度低时，蛋氨酸合成酶影响Hcy的排出；浓度高时，CBS是排出的关键。 导致Hcy的原因 遗传缺陷：CBS和MTHFR基因突变可导致酶活性下降,致使Hcy代谢障碍,血浆Hcy水平升高。人CBS基因位于21q22.3上，全长28046bp，可编码551个氨基酸，多态性位点有13种，突变位点有131种。目前研究显示，CBS部分变异位点有明显种族和区域差异。C833T、G919A位点上的变异均造成了CBS酶活性中心性空间构象的改变，降低酶功能，使血中Hcy浓度升高。 G307S突变发生于 第8外显因子上，此区域是Hcy的结合区，可能影响底物Hcy与CBS的结合，这与此类突变患者对维生素B6不敏感的实验发现相一致。此外，A226T、R224 、I278T和T351M突变体使缺失了C-端140个残基的CBS功能抑制。人MTHFR基因定位于1p36.3上。Frosst等应用PCR2 SSCP技术证明MTHFR基因在766位发生点突变,碱基T置换了碱基C,其编码的氨基酸由缬氨酸替代了丙氨酸,使MTHFR活性大大减低,引起Hcy再甲基化受抑制,导致血浆Hcy浓度升高。 营养障碍：摄入的维生素B6、维生素B12、叶酸不足,造成体内维生素、叶酸缺乏。由于维生素B6是CBS及胱硫醚酶的辅酶,缺乏时使这两种酶代谢发生障碍,引起Hcy在体内堆积；维生素B12是蛋氨酸合成酶的辅酶,而叶酸则是体内甲基的间接供体，两者缺乏,阻碍了蛋氨酸的再生成,同时造成Hcy的蓄积。 性别与年龄：女性血浆Hcy浓度低于男性，男女均随年龄增大而增加,绝经期后Hcy可以增高或不变,原因可能是：雌激素影响Hcy代谢；老年人辅助因子维生素B6和维生素B12及叶酸缺乏，使各种蛋氨酸代谢酶活性降低;老年人肾功能减退。 药物：氨甲喋呤可使5-甲基四氢叶酸浓度降低，蛋氨酸合成酶的底物减少；一氧化氮（NO）可使依赖维生素B12的蛋氨酸合成酶失活；卡马西平、苯妥英钠干扰叶酸代谢；阿扎立平可抑制胱硫醚酶活性,上述药物均有升高Hcy的作用。 此外,种族、生活习惯、地区及其他疾病等因素也会影响血浆Hcy的水平。 Hcy正常值 Hcy的血浆浓度随年龄增张而升高，男性高于女性。一般认为（国外标准）空腹血浆Hcy水平在5～15μmol/L之间属于正常范围，≥16 μmol/L可定为高半胱氨酸血症。 Hcy检测方法 高压液相法（HPLC）：采用柱前衍生化后荧光检测技术，色谱多采用150X4.6mm的反相C18柱，以bromobimane为衍生化试剂，用乙腈进行梯度洗脱，同型半胱氨酸的保留时间约为4.14分钟。该法灵敏度高，精密度好，但价格昂贵。 高压液相仪 荧光偏振免疫检测（FPIA）：先将同型半胱氨酸还原，然后通过酶催化同型半胱酸转变为S腺苷同型半胱氨酸，再加入荧光标记的S腺苷同型半胱氨酸类似物作示踪物，两者与特异性的单抗竞争结合，通过示踪的偏光性的改变检测同型半胱氨酸浓度。但准确度差。 荧光偏振仪 酶标法（ELISA）：将同型半胱氨酸转变为S腺苷同型半胱氨酸，再加入酶标的单抗，最后底物显色，通过检测S-腺苷同型半胱氨酸而间接计算同型半胱氨酸浓度，但特异性差。 英国DREW公司推出的世界上第一台同型半胱氨酸HPLC检测仪器 DS30同型半胱氨酸检测仪 现代医学中Hcy致病机制的学说 血管内皮细胞的毒性作用：NO在生理条件下，可与Hcy相互作用形成S-亚硝基同型半胱氨