BMP-2诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的实验的分析研究.pdfVIP

BMP．2诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的实验研究 中文摘要 BMP．2诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞 分化的实验研究 中文摘要 目的：冠心病在发达国家的发病率和死亡率都居于第一位，通常认为心肌细胞在 出生后即不能再生，心肌细胞死亡后大量的心肌细胞由疤痕组织替代，导致局部的心 肌收缩紊乱，心功能下降，最后导致充血性心衰。本试验针对心衰的基本病理生理， 通过BMP．2诱导后的骨髓间充质干细胞移植入受损的心肌内，改善心室重构，促进梗 死区血管新生来增加干细胞修复受损心肌的治疗效果，并进一步探讨干细胞治疗缺血 性心肌病的机理。 方法：从健康梅山猪骨髓中分离培养BMSCs，取第四代骨髓间充质干细胞，用B MP．2诱导24dx时，促进其向心肌细胞定向分化，免疫细胞化学检测诱导后不同时间点 的心肌特异性蛋白cTnT和CX．43及MHC的表达。 健康雄性梅山猪15只随机分为3组，经心导管用明胶海绵栓塞LAD第二对角支建 DMEM；B 立心梗模型，A组(对照组)：梗死四周后通过介入方法在心梗区移植5ml 组(干细胞组)：梗死四周后在心梗区移植1 在心梗区移植1x107个经BMP．2诱导分化后的BMSCs。 检测心梗前后及移植后心功能的变化，Ⅷ因子免疫组化染色计数新生毛细血管数 量，Westernblot检测各组梗死区GATA．4蛋白表达，ECT检测心肌缺血状况，大体标 本TTC法检查各组心梗面积的变化。 结果：利用Ficoll分离和贴壁培养的方法可以获取稳定分裂的梅山猪骨髓间充质 干细胞。用BMP．2诱导后，MCSs的形态和排列发生变化。免疫细胞化学染色显示，c X．43在3周位于细胞膜下，4周呈颗粒状密集分布于肌管的相邻细胞连接处；三周后可 降明显(与心梗前比较，P0．05)，移植后，随着时间的延长，B、C组的心功能较移 I BMP．2诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的实验研究 中文摘要 blot检Nc 两组，C组的心梗面积缩小，新生毛细血管数量增多(P0．05)；Western 血状况改善明显。 结论：BMP．2可以在体外诱导MSCs分化为心肌样细胞并表达心肌特异性蛋白， 诱导后的骨髓间充质干细胞可以在梗死心肌内存活、增殖并分化，移植经BMP．2诱导 后MSCs较移植未经诱导的MSCs能更好促进毛细血管的再生，改善心肌缺血状态， 从而更好的改善心功能。 关键词：骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白．2 心肌分化 作 者： 丁以国 指导老师： 沈振亚教授 II BMP-2诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的实验研究 英文摘要 ofbone StemCells Empiricalstudy Mesenchymal …一rentiatiqintoint,cardiaccardiaccellscellsinduced’inducedMP．2jⅥ上，一=乙 by Abstract heartdiseaseremainsthefirstcauseof and objective：Coronary morbiditymortality