Bcl-2%2cBcl-xlsiRNA对HepG2细胞药物敏感性影响.pdfVIP

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2017-09-08 发布于安徽
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Bcl-2%2cBcl-xlsiRNA对HepG2细胞药物敏感性影响.pdf

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（28.07±1.98 ％,23.30±4.08 ％,21.13±2.24 ％vs7.37±1.17 ％ or 7.65±0.64 ％ ; 38.01±1.26 ％ ,30.93±1.89 ％ ,28.87±0.74 ％vs21.95±3.47 ％ or 22.10±2.01 ％ ; 63.63±0.56 ％ ,37.62±0.76 ％ ,37.11±1.09 ％ vs29.27±2.03 ％ or 30.10±1.86 ％ ;73.10±0.86 ％ ,63.40±3.08 ％ ,61.86±2.20 ％ vs40.98±2.40 ％ or 41.15±1.19 ％ P0.05 ）；当不同浓度的 HCPT （018 ，0.36 ，0.72 ，1.44mg/L）孵育细胞 24 小时后，MTT 结果表明 Bcl-2 siRNA/Bcl-xl siRNA 共转染组、Bcl-2 siRNA、Bcl-xl siRNA 转染组的细胞生长抑制率明显高于阴性载体转染组和正常细胞（25.92±3.18 ％， 19.02±2.06 ％， 19.02±1.54 ％ vs 10.97±0.65 ％ or 10.40±0.43 ％;51.85±1.02 ％，46.91±0.98 ％，46.01±2.75 ％vs27.11±2.13 ％ or 26.82±1.78 ％ ; 63.70±1.16 ％ ,54.32±0.45 ％ ,53.38±2.96 ％vs47.98±1.78 ％ or 47.98±0.88 ％ ;75.29±1.95 ％ ,61.73±0.67 ％ ,58.90±1.78 ％ vs53.18±1.36 ％ or 52.60±2.03 ％ P0.05 ）。5-FU 或 HCPT 药物的 IC50 值在 Bcl-2 siRNA/Bcl-xl siRNA 、Bcl-2 siRNA 、Bcl-xl siRNA 细胞较正常细胞和阴性转染组均有明显降低, Bcl-xl siRNA 转染组与 Bcl-2 siRNA 转染组无明显差异，且加5-FU 时Bcl-2 siRNA/Bcl-xl siRNA CI 值为 0.214(CI 小于 1)，加HCPT 时Bcl-2 siRNA/Bcl-xl siRNA CI 值为0.945(CI 小于1)，表明Bcl-2 siRNA/Bcl-xl siRNA 具有协同作用。流式细胞术结果表明细胞凋亡率在 Bcl-2 siRNA/Bcl-xl siRNA,Bcl -2 siRNA ， Bcl-xl siRNA 转染组高于正常细胞和阴性载体转染组；而且 Bcl-2 siRNA/Bcl-xl siRNA 共转染组高于 Bcl-2 siRNA ，Bcl-xl siRNA 转染组。Western blot 结果表明在 Bcl-2 和 Bcl-xl 表达下调时，Bax 蛋白表达水平不变而caspase-3 蛋白活性增强。结论 1.RNAi 下调目的基因Bcl-2 和Bcl-xl 能增强人类肝癌细胞HepG2 对化疗药物 5-FU 和HCPT 的敏感性。 2.HepG2 细胞对 5-FU 和HCPT 敏感性增强与 Bax/Bcl-2 、Bax/Bcl-xl 的比例增高和caspase-3 蛋白活性增强有关。关键词 RNAi ；Bcl-2; Bcl-xl; HepG2 3 Effect of Bcl-2 and Bcl-xl siRNA on drug sensitivity of HepG2 cells ABSTRACT AIM To investigate the changes of the drug sensitivity and mechanism in Bcl-2 and Bcl-xl siRNA transfected HepG2 cells. METHODS Bcl-2,Bcl-xl siRNA and negative siRNA expression vector were constructe