管柱层析法.pdfVIP

管柱層析法 一、實驗目的 ： 了解薄膜層析法 TLC 、管柱層析法CC 的應用及其操作 二、實驗原理 ： （1）自層析法問世八十多年來 ，層析法已成為分離化合物最有利的 工具 。除了提供成千上萬的有機化合物的分離之外，還提供了定性鑑 定及定量分析的數據 。與傳統的分離純化方法（蒸餾、再結晶、萃取、 昇華等）相比 ，層析法具有微量、快速、簡便、安全及高效率等優點。 （2 ）層析法可分為三大類 ：吸附層析法、分配層析法及離子交換層 析法 。依其操作不同，可分為氣相層析法（Gas chromatography ）及 液相層析法 （Liquid chromatography ）。其中氣相層析法因牽涉到儀器 分析 ，在有機化學實驗中並不予討論，我們僅僅討論液相層析法。 （3 ） 液 相 層 析 法 又 可 分為 薄 膜 層 析 法 TLC （Thin Layer Chromatography ）、管柱層析法 CC （Column Chromatography ）、濾紙 層析法 PC （Paper Chromatography ）及高效率液相層析法HPLC （High Performance Liquid Chromatography ）。 1 、薄膜層析法TLC ： 薄膜層析法屬於吸附層析的一種 。由於混合物中的各個組成份對 固定相（Stationary phase ）的吸附能力不同 ，當移動相（沖堤液，Mobil phase ）流經固定相時 ，便會發生無數次的吸附和解吸，吸附力弱的 的組成份隨流動相迅速向前移動 ，吸附力強的組成份滯留在後，由於 各組成份具有不同的移動速率 ，最後得以在固定相上分離。這一過程 可表示為 ：化合物在固定相 化合物在流動相 。 平衡常數 K 的大小取決於化合物吸附能力的強弱 。一個化合物 愈強烈地被固定相吸附 ，K 值愈低 ，則這個化合物沿著流動相移動的 距離就愈小 。 (1)R 值（Rate of flow ）： f 一個化合物在薄層板上升的高度與展開劑上昇高度的比值稱為該化 合物 R 值。 f Rf(A)=a/c Rf(B)=a/c (2)展開劑 （沖提液，elution ，移動相）： 如果展開劑的極性遠大於混合物中各組成份的極性 ，則最後展 開劑將代替各個組成份而被固定相吸附 ，各個組份將幾乎完全存在流 動相中 ，各個組份具有較高的R 值。 f 如果展開劑的極性遠低於混合物中各個組成份 ，則最後各組成 份將被吸附在固定相中 ，而無法被展開劑所遷移，即R ＝0 。 f 一般常用展開劑極性大小 ： 由小到大由小到大 由小到大由小到大 正己烷 ＜四氯化碳＜甲苯＜苯＜二氯甲烷＜乙醚＜氯仿＜乙酸乙酯 ＜丙酮＜乙醇＜甲醇 。 4化合物官能基之極性大小 ：由小到大由小到大 由小到大由小到大 烷類 ＜鹵化烷類＜烯類＜雙烯類＜鹵芳香族＜醚類＜酯類＜酮類＜ 醛類 ＜胺類＜醇類＜酚類＜羧酸類＜硫酸 。 (3) 固定相 ： 為固定不動的吸附劑其成分可分為兩種－－矽膠及氧化鋁 。矽膠適用 於分離極性較大的化合物 ；相反的，氧化鋁適用於分離極性較小的化 合物 。 (4)顯色 ： TLC 展開後 ，如果樣品本身有顏 色 ，可直接以肉眼觀察斑點的位置 。 如果樣品是無色的時候 ，就存在一個顯色的問題 。常用的顯色方法有 下列幾種 ： 噴顯色劑 紫外燈顯色 ：如果樣品本身是發 螢光的物質 ，可以將TLC 片 放置紫外光下照射 ，則化合物會吸收紫外光而呈現黑點化合物會吸收紫外光而呈現黑點 。