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第2章材料与方法
第2章材料与方法
2．1实验材料
2．1．1实验动物：
健康杂种犬16条，均为雄性，体重12．6-a：1．4kg(江西医学院动物实验中心
提供)。
2．1．2主要试剂：
内毒素 (LPS，Sigma，Escherichia，coli，055：135)
氯胺酮 (福建古田制药厂)
地西泮 (安定，西安利君制药股份有限公司)
琥珀胆碱 (司可林，上海旭东海普药业有限公司)
碳酸氢盐置换液
3．2m1)
TNF．Ct放免试剂盒
(北京美迪科生物技术有限公司)
IL-6放免试剂盒 (北京美迪科生物技术有限公司)
IL—lO放免试剂盒(北京美迪科生物技术有限公司)
其它试剂如100％乙醇、95％乙醇、二甲苯等均为国产分析纯。
2．1．3主要仪器：
CRRT 德国，贝朗
Diapact
血滤管路 德国，贝朗
AV-400聚砜膜滤器 德国，费森尤斯
血流动方学监护仪 日本光电
Newport呼吸机 美国
2
第2章材料与方法
呼气末二氧化碳监测仪 美国，GENEGE醐，S
康林248型血气分析仪 美国
SN-697全自动双探头放射免疫计数器 江苏
双腔血透导管 ARROWUS
5#Swan．Ganz气囊漂浮导管 ARRoWUS
WZS．50F2微量输液泵 浙江大学医学仪器有限公司
CB—B聚氨酯动脉导管 佛山市特种医用导管有限公司
7．5撑气管导管 新乡市驼人医疗器械有限公司
2．2实验步骤
2．2．1动物模型建立：
气管导管，连接Newport呼吸机，司可林及氯胺酮混合液微量泵入维持肌松及
使呼气末二氧化碳分压在40mmHg左右。双侧腹股沟备皮、常规消毒、铺巾，
分别分离左侧股动脉、股静脉及右侧股静脉，经左侧股静脉插入双腔血透管，。
用于HVHF治疗；经左侧股动脉插入动脉留置导管，用于采集动脉血标本和动
脉直接测压；经右侧股静脉插入5捍Swan．Ganz导管，用于血流动力学监测。在
导丝引导下，从尿道插入内径为2mm的一次性塑料导管，用于监测每小时尿量。
2．2．2内毒素诱导休克犬模型：
操作完毕稳定30
min后，取得各参数基础值，经中心静脉用微量输液泵在
30
min内注入LPS
6501ag／kg，同时监测平均动脉压，当平均动脉压下降至基础
值的20％时认为模型复制成功【5】。实验过程中呼吸机参数不变，并根据平均动
脉压(MAP
mmHg)、中心静脉压(CVPcmH20)、肺动脉压(PAPmmHg)、肺
动脉楔压(PAWP
mmHg)以及尿量予以调整输液：乳酸林格氏液通常按7ml／kg／h
第2章材料与方法
补液应回到前一水平。
2．2．3动物分组
内毒素休克犬模型制备成功后，将动物随机分为对照组及治疗组(每组各8
条)，对照组采用机械通气治疗+假治疗，治疗组采用机械通气+高容量血液滤过
(HVHF)治疗。
2．2．4HVHF治疗
用Diapact
4小时。假治疗组血液只行体外循环，血流量为120ml／min，不连接置换液及滤
器。实验过程中呼吸机参数不变。
2．2．5观察指标及方法
2．2．5．1观
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