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[含一、二、三、四章];一、限制性核酸内切酶和DNA连接酶作用解析 1．限制酶 限制酶具有专一性，表现在两个方面 (1)识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列。 (2)切割特定序列中的特定位点。使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。产生的DNA片段末端通常有两种形式——粘性末端和平末端。 ;②平末端：当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的则是平末端。 如：Sma Ⅰ识别CCCGGG序列，将C与G两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。如下图所示： ;2．DNA连接酶 (1)DNA连接酶的分类 根据酶的来源不同，可以将这些酶分为两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为E·coli DNA连接酶；另一类是从T4噬菌体中分离出来的，称为T4 DNA连接酶。 (2)DNA连接酶的作用 DNA连接酶的作用是将限制酶切下来的DNA片段拼接成新的DNA分子。两类DNA连接酶都是将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。如图所示：;3．几种易混淆酶的比较;二、基因、基因文库和目的基因的概念比较 1．基因：具有遗传效应的DNA片段，是控制生物性状的遗传物质的结构和功能单位，基因的脱氧核苷酸序列代表遗传信息。 2．基因文库 (1)含义：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中通过克隆而储存，含有这种生物的不同基因的受体菌群体便构成了基因文库。 (2)分类 ①基因组文库：含有一种生物的所有基因的基因文库。 ②部分基因文库：含有一种生物的部分基因的基因文库，如cDNA文库。 (3)建立基因文库的目的：为保存或获得大量的目的基因作准备。 3．目的基因：基因工程操作中需要的外源基因，它是编码某种蛋白质的结构基因，如生物的抗逆性基因、抗虫基因等。;1．下图为转基因抗病香蕉的培育过程流程图，其中质粒上的Pst Ⅰ、Sma Ⅰ、EcoR Ⅰ、Apa Ⅰ等四种限制酶的识别序列及切割位点见下表。请据图回答下列问题：;(1)图中①②表示组织培养过程中香蕉组织细胞的________。利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组 织细胞培育成植株，证明了香蕉组织细胞具有________。 (2)形成重组质粒A时，应选用的限制酶是________，对________进行切割。 (3)一个质粒被限制酶EcoR Ⅰ、Pst Ⅰ、Sma Ⅰ同时切割后可得到________个DNA片段，________个粘性末端。 (4)培养基中的氨苄青霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使重组质粒A中含有________基因。;解析：(1)图中①②表示组织培养过程中香蕉组织细胞的脱分化和再分化的过程。把转入了抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株的过程，证明了香蕉组织细胞具有全能性。(2)分析题图，在抗病基因的两端有两个限制酶切点，即Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ限制酶切点，故可以用它们切割获得目的基因。同样用这样的限制酶切割质粒，以获得相同的粘性末端。(3)一个质粒被限制酶EcoR Ⅰ、Pst Ⅰ、Sma Ⅰ同时切割后可得3个DNA片段，共有4个粘性末端。(4)由于氨苄青霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，若在这样的培养基中培养香蕉时，必须让香蕉细胞具有抗氨苄青霉素的能力。 答案：(1)脱分化和再分化　全能性 (2)Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ　含抗病基因的DNA和质粒 (3)3　4 (4)抗氨苄青霉素(或氨苄青霉素抗性);三、细胞工程 1．动物细胞培养、植物细胞培养的比较;器皿;2.植物体细胞杂交和多倍体育种;3.试管动物与克隆动物的比较;生殖 方式;2．克隆羊的成功轰动世界，它不仅奠定了克隆性治疗疾病的基础，而且解决了器官移植中供体不足的问题，但同时也给人类带来了一些过去从未遇到的问题。图为人类对克隆羊技术的拓展和应用，请据图回答：;(1)图中所涉及的现代生物技术有________和________等。 (2)(多选)下列有关胚胎移植的叙述正确的有________。 A．冲卵指的是从子宫中冲出胚胎，而非冲出卵子 B．只有供、受体的生理环境高度一致，移入受体的胚胎才能被接受 C．供体和受体要进行免疫检查，防止发生免疫排斥反应 D．不同动物胚胎移植的时间不同，人的胚胎移植最好在原肠胚时期进行 (3)图中两个克隆动物长大后，各方面特征与原型动物相似，这说明________具有全能性，早期胚胎发育在________阶段以前的细胞是全能细胞。 (4)使用培养基进行胚胎干细胞培养时，通常要加入________等天然成分，除了保证被培养细胞处于无菌、无毒及氧气充足的环境中，还需要保证细胞生活所需的________。 (5)图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中，一般用________处理内细胞团，使之分散成单个