环节表面菌落总数大肠菌群的测定.pptVIP

优缺点 分子生物学方法检测致病菌，特异性较强，技术较为前沿，特别是相对国标方面来说。 假阳性概率仍然较高，因此只能作为一种初筛方法。 速度方面：仍然需要增菌，一般是第二天出结果，与免疫法比没有速度优势。 目前不少产品已经通过AOAC的认证。 （三）分子生物学方法 六、微生物检测流程图 固体样品：取1:10溶解稀释液 液体样品：取原液 致病菌检测试剂盒 36℃培养6h～18h 如果某增菌液发生混浊 即预示含有某种致病菌 可将混浊的增菌液接种到相应测试片上， 36℃培养18～24h验证结果 1. 食物中毒样品的快速筛查 2.卫生指示菌与致病菌的监测 固体样品：取1:10、1:100或1:1000溶解稀释液 液体样品：取原液、1:10或1:100稀释液 加入到各测试片或试剂盒中 36℃培养 根据各测试片或试剂盒的培养时间观察检测结果 加样 培养 阳性 阴性 液体样品：直接倒入试剂盒刻度处，培养18～24h观察结果 固体样品：稀释后按以上操作。 七、试剂盒大肠菌检测结果图像 §2.1环节表面菌落总数的快速检测 适用范围：餐厅、宾馆、饭店、食堂与个体摊点及其他直接入口的食品生产、加工和销售单位的环节表面的检测 本次实验检测场所：冷菜间的砧板 试剂：菌落总数测试片 采样方法：接触法（涂抹实验） 1）揭开覆盖薄膜，加1ml无菌生理盐水于无纺布棉垫上，使棉垫浸湿后盖上薄膜； 2）再次完全揭开薄膜，将测试片上无纺布棉垫贴于样品表面，完成取样，盖上覆盖薄膜。 培养：36±1℃,48±3h 结果判定：同国标 §2.2环节表面大肠菌群的快速检测 检测场所：消毒后的餐具 试剂：大肠菌群测试片 操作： 1）揭开覆盖薄膜，加1ml无菌生理盐水于无纺布棉垫上，使棉垫浸湿后盖上薄膜； 2）再次完全揭开薄膜，将测试片上无纺布棉垫贴于样品表面，完成取样，盖上覆盖薄膜； 3）培养：36±1℃,24±1h。 作业 微生物测试片的定义？ 开展微生物快速检测所需的基本条件？ 常规微生物检测方法？ 实验报告 * 《食品安全快速检测》 上海农林职业技术学院 《食品安全快速检测》 上海农林职业技术学院 《食品安全快速检测》 上海农林职业技术学院 1.微生物快速检测的意义 2.微生物快速检测的基本条件 3.微生物快速检测的方法 一、开展微生物快速检测工作的意义 据世界卫生组织估计，在全世界每年数以亿计的食源性疾病患者中，80％是由于食用了各种致病性微生物污染的食品和饮水造成的。2000年至2012年，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所对全国部分省市的生肉、熟肉、乳和乳制品、水产品、蔬菜中的致病菌污染状况的监测结果表明，微生物性食物中毒仍居首位，占39.62％；化学性食物中毒占38.56％；动植物性和原因不明的食物中毒均占10％左右。 传统的微生物检测方法，主要包括形态检查和生化方法，涉及的实验较多、操作繁琐、需要时间较长、准备和收尾工作繁多。 1955年德国学者F.J.Forg 发明了一种简单快速的大肠菌群快速检测法—纸片法，使原来的检测周期由72小时缩短到15小时，材料成本降低了四分之三，同时大大简化了操作程序。从此，这种生化检测方法开始发展起来。 另外，将培养基固化在试剂盒中的速测盒法，也是一种较为简洁快速的检测方法，省去了大量的实验准备工作。 二、开展微生物快速检测所需的基本条件 一间通风良好、面积不需要很大的独立房间或野外帐篷； 一个便携式紫外线消毒灯； 一台便携式恒温培养箱； 一个食品微生物快速检测箱，箱内备有实验用的工具和器皿、检测用测试片和试剂盒。 有条件时，可增加一台高压锅或红外线消毒柜（家用消毒碗柜也可）； 具备以上设备和无菌操作概念即可进行现场快速检测了。 1. 点燃酒精灯，营造局部无菌环境。取样和加样时尽量靠近酒精灯操作。操作工具如镊子、剪子、长柄勺、小刀等，在酒精灯上用火焰消毒后使用。 2. 用75%酒精棉球将手和样品开口处周围抹擦消毒。 3. 将无菌袋或无菌器皿放在天平上，用无菌器皿拿取样品称量25g或25ml，加入225mL生理盐水将样品溶解，或将样品放入盛有225mL生理盐水的均质管中将样品溶解（此为10倍样品稀释液），从中取1mL加入到无菌试管中，加入9mL生理盐水，混匀（此为100倍样品稀释液），一般情况下，取原液和10倍及100倍样品稀释液进行检测。 4. 餐饮具卫生状况的检测，按照国家标准GB14934纸片法进行。 三、无菌操作和注意事项 四、常见微生物检测项目 常规微生物项目 细菌总数、大肠菌群、大肠杆菌、霉菌及酵母菌 致病微生物项目 沙门氏菌、李斯特菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157：H7、弯曲杆菌、致病弧菌、副溶血弧菌、志贺氏