猪CFTR氯离子通道小分子抑制剂的合成、体内分布和药动学分析研究.pdfVIP

猪CFTR氯离子通道小分子抑制剂的合成、体内分布和药动学研究 摘 要 fibrosis，CF)是白种人中最常见的一种致死性常染 囊性纤维化(Cystic 色体隐性遗传疾病。主要临床症状是反复发生的肺部感染和纤维化，并最终 导致肺功能的不可逆性的破坏。CF是由于囊性纤维化跨膜电导调节因子 fibrosistransmembraneconductance (cystic 造成的。CFTR是一种受cAMP激活的Cl。通道，主要在呼吸道、小肠、胰腺 等处的上皮细胞中表达。目前已经发现了超过1300种能够引起CF的CFTR 复杂，尚缺乏有效的治疗办法，致使CF患者的平均寿命只有35岁左右。目 因敲除模型。AF508．CFTR转基因小鼠和CFTR基因敲除小鼠已成功建立。 但是由于小鼠呼吸道粘膜下腺的分布与人不同，以及其它氯离子通道的代偿 作用，致使上述小鼠模型并不出现CF病人的肺部纤维化表现，因此急需建 立一个能更好地模拟人CF病理的大动物模型。猪在器官解剖结构和生理功 能方面与人类非常相似，适于建立CF动物模型。从猪小肠组织中克隆到猪 CFTR的cDNA，经多物种之间的分析比对表明，在基因和蛋白水平上同人 CFTR的相似性在90％以上，具有较高的同源性。其组织特异性表达与人相 似，在支气管、胰腺和小肠中高表达。近年来，利用高通量筛选方法从组合 病变模型提供了有力工具。CFTRinh．172是国际上利用高通量筛选技术获得 的第一个人CFTR特异性抑制剂，其对人、小鼠、大鼠、猪等多种动物CFTR 溶解性较差，在肺的分布较低，利用其制作猪CF模型的尝试并未获得成功。 GlyHl01的筛选成功为诱导大动物CF病变模型带来了新的希望，同 01具有水溶性好、作用迅速的特点，因此，其可 CFTRinh．172相比，GIyHl 能成为制作大动物CF模型的有效药物。研究GIyHl01在体内分布和动力学 特征是利用其建立动物模型的基础与关键。 101的HPLC检测方法，对所建方法进行了 本文建立了组织样品中GIyH 猪CFTI≈氯离子通道小分子抑制剂的合成、体内分布和药动学研究 系统评价(线性关系，方法回收率，精密度及萃取回收率)，结果表明此方 法准确，可行。利用所建立的方法系统分析了小鼠多种组织样品中GlyHl01 的动态分布。首次研究了GIyHl01经腹腔注射给药后在生物体内的分布情 况，为CFTR特异性抑制剂的动物体内生理活性研究，以及CFTR功能蛋白 敲除的大动物模型建立提供参考。 与CFTRinh．172相比其在溶解度方面有了显著改善，但是前期研究表明其对 猪CFTR的亲和力也不十分理想。因此，我们针对猪CFTR建立了高通量筛 选细胞模型对小分子化合物库进行筛选。获得了一种全新的，高亲和的，猪 CF模型和治疗仔猪腹泻奠定基础。 此外，本文还探讨了体内液体转运过程中的水转运。我们利用唾液腺囊 其意义，试图揭示唾液腺分泌过程中水通道与C1．通道之间的协调作用。 关键词：囊性纤维化(CF)；囊性纤维化跨膜电导调节因子(CFTR)； 猪CF模型；腹泻；药物分布；药物动力学 猪CFTR氯离子通道小分子抑制剂的合成、体内分布和药动学研究 Abstract themost lethalautosomal fibrosis(CF)is recessive Cystic prevalent in diseaseCaucasians．Themost clinical is genetic significantsymptom recurrentinfectionsandfibrosisthatresultsinirreversibledeteriorationin lung function