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对中成药逍遥丸质量标准测定及研究[摘 要] 目的：建立（当归、柴胡、甘草、白芍等）逍遥丸的质量标准。方法：采用薄层色谱（TLC）法鉴别当归、甘草、白芍；采用高效液相色谱（HPLC）法测定芍药苷的含量。结果：芍药苷的平均加样回收率为99.9%，RSD=1.52%（n=4）。结论：该法简便准确，可作为该制剂质量控制标准。 [关键词] 逍遥丸；当归；薄层色谱法；加样回收率 逍遥丸由柴胡、当归、白芍、甘草等中药组成.具有疏肝健脾，养血调经的功效。为了更好控制该制剂的质量，保证用药的安全有效，通过实验研究，我们采用薄层色谱鉴别法对处方中当归、柴胡、白芍、甘草进行鉴别；采用高效液相色谱法测定芍药中芍药苷含量。从而使该制剂的质量标准得到进一步完善。 1.仪器与试药 DIONEX液相色谱仪，数控超声波清洗器（KQ-300DB昆山市超声仪器有限公司）、数显恒温水浴锅（HS-4上海康华生化仪器制造有限公司）、电热恒温鼓风干燥箱（DHG-9075A上海一恒科技有限公司），逍遥丸：市售品。当归对照药材、甘草对照药材、芍药苷对照品均由中国药品生物制品检定所提供。乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。 2.实验方法 2.1鉴别 2.1.1当归的TLC鉴别 取本品5g，研细，加乙醚20mL，超声处理15min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照药材0.5g，加乙醚10mL。同法制成对照药材溶液。当归阴性样品溶液同法制成。吸取上述3种溶液各5micro;L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（9：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。当归阴性样无干忧。见图1。 2.1.2甘草的薄层鉴别 取样品粉末5g，加乙醇40ml，超声处理20min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，再加乙醚萃取2次，20ml/次，合并水层用水饱和的正丁醇振摇提取2次，20ml/次，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇lml 图一 当归的PLC色谱 图二 甘草的PLC色谱 图三 芍药的PLC色谱 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 使溶解，作为供试品溶液。再取甘草对照药材lg，加乙醇20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法，吸取上述3种溶液各5micro;l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15：l：l：2）为展开剂，展开，取出。晾干，喷以10%的硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照样品无干扰。见图2。 2.1.3白芍的PLC鉴别 取2.1.2项下剩余的供试品溶液，加中性氧化铝2g，置水浴上拌匀、干燥，加在中性氧化铝柱（200目，2g，内径lcm）上，用甲醇40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取不含白芍的阴性对照样品，同法制成阴性对照样品溶液。再取芍药苷对照品，加乙醇配成每毫升含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各3micro;l，分别点于同一块硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸（40：5：l0：0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，105℃加热显色，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照样品无干扰。见图3。 2.2芍药苷含量测定 2.2.1色谱条件 色谱柱：KromasilCl8（250mm×4.6mm，5micro;m），流动相：乙腈-水（20：80），流速：1.0ml/min，柱温：25℃，检测波长：230nm，进样量lOmicro;l。 2.2.2供试品溶液的制备 取供试品，研碎，取约0.5g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约40ml，超声处理30min，放冷，用稀乙醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 2.2.3对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品适量，加稀乙醇制成每毫升约含50g的溶液，即得。 2.2.4阴性对照实验 取不含白芍的阴性样品，照供试品溶液制备方法制备，即得阴性样品溶液。 2.2.5测定波长的选择 取芍药苷对照品溶液，于紫外分光光度计上扫描，结果芍药苷的最大吸收波长为230nm，作为测定波长。 2.2.6系统适应性实验及空白实验 取上述3种溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。结果，供试品色谱中，芍药苷峰与其它组分峰达到基线分离。理论板数按芍药苷峰计算为4000；阴性对照溶液色谱中，在与芍药苷峰相同保留时间处，无吸收峰，即阴性对照无干扰。