第二章节色谱法基本原理.ppt

对于一定的色谱柱（两相，k,n一定）， 2.7.2 分离与分析时间的最佳化 ——单位时间有效塔板数 表：气相色谱与液相色谱的 值 柱型 气相色谱 ? 经典填充柱 dp=130 10 空心柱dp=0.25 25 多空层填料dp=90 50 流动相色谱 ? 经典柱dp=150 0.02 二氧化硅填料dp=20 2 多孔层填料dp=27 8 2.4.4 速率理论方程式的讨论 （1）流速对塔板高度H的影响 曲线的最低点H最小，以Hmin表示，柱效能 最高。该点对应的流速称为最佳流速： GC曲线与LC曲线不同的原因： Dm大，当 低时，分子扩散项 影响显著。 (2)固定相颗粒 的影响 2.5 影响谱带扩宽的其他因素 1.非线性色谱 速率理论假定分配等温线是线性的，在实际工作中，经常遇到的是非线性等温线。 2.活性中心的影响 载体或吸附剂表面的活性中心对组分的吸附力太强，使组分迟迟不得释放而造成拖尾。 解决办法： ①将载体进行预处理，去除表面的活性中心； ②在LC中，在流动相中加入缓和剂。 3.柱外效应 进样的方式和进样技术，以及进样器、检测器、连接管的死体积造成的谱带扩宽，称为柱外效应。 柱外效应常用柱外效应引起峰体积的相对增大值作为度量指标： 峰体积 进样器 色谱柱 检测器 柱内宽化服从速率理论方程 柱外某连接管溶质的宽化为： 式中， d:连接管内径(0.25-0.3mm) L:连接管的长度 流动相体积流速 死体积愈小，柱外宽化愈小，一般控制不超过 总宽化的10%。 影响谱带扩展的各种因素为： 四种动力学因素 涡流系数 纵向分子扩散 固定相传质阻力 流动相传质阻力 其他 非线性等温 活性中心 死体积 进样管 连接管 检测器 其他 进样技术 气化温度 2.6 分离度及其影响因素 2.6.1 分离度的定义 色谱分离的三种情况 实现分离的条件 峰间距： 峰宽：柱效能增大 ，峰宽减小 全面反映两峰分离程度的参数－分离度R 相邻两峰保留时间之差与两组分色谱峰的 峰底宽度之和的一半的比值称为分离度R 对于对称的高斯峰 R=0.8时，分离程度89％ 一般采用R=1.5作为相邻两峰完全分离的标志。 2.6.2 基本分离方程式 上式称为基本分离方程式，是色谱分析 中最重要的方程式之一，可以计算给定体系 所能达到的分离度和达到某一分离度所需 的色谱柱长。 2.6.3 影响分离度的因素 （1）色谱柱效n 增加n的方法： ①降低H，制备性能优良的柱子，在最优化的 条件下操作。 ②增加柱长： 若系统压力不变，则必须降低流速， 若分析时间不变，则必须增大柱压，对设备要求提高 （2）相对保留值a α增大，柱选择性提高，R增大。 1.0 1.001 1.01 1.1 1.5 2.0 0 0.001 0.01 0.091 0.33 0.5 α从1.01 1.1，增加9％。R增加9倍。 α从1.5 2.0，增加33％。R增加1.5倍。 α 1，改变α，R增大。 α较大时，对R的影响小，α1-2已足够。 若要达到一定的分离度，在k不变的情况下，α的微小增加，将使n显著 下降。 ? 1.01 1.03 1.05 1.07 1.10 1.20 1.30 1.0 163000 18900 7060 3740 1940 576 301 1.5 367000 42500 15900 8420 4360 1300 677 R n α 改变α的方法 GC：固定相，柱温 LC：固定相，流动相 （3）分配比 k 即分离度正比于溶质在固定相中所占的分数。 总的说，k增大，R增大。 k 0 0.5 1.0 2.0 3.0 5.0 10 50 100 ? 0 0.33 0.5 0.67 0.75 0.85 0.91 0.98 0.99 当k很小时， 随k增大，R增大。 k5以后，k增大，R的增加缓慢。 k10后，增大k对R的改进不明显，反而使 改变k的方法： ①改变固定相 ②改变柱温（GC）或流动相（LC） ③改变相比 （改变VS及柱死体积Vm) α,n,k对R的影响可用下图表示： 改变 k对分离产生很大的影响 ①若原始k=0.5~2, k减小，tR减小，R减小， k增大，R增大，峰高降低，峰宽增大。 ②若柱长不变下增