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微生物染色法
* 三 、细菌染色法: 负染色 涂片 干燥 固定 染色1min 水洗、吸干 镜检 简单染色 制备涂片标本→染色 步骤: 涂片固定 酸性复红初染 3%醋酸酒精脱色 美蓝复染 镜检 抗酸染色法 结果: 抗酸菌———红色; 非抗酸菌——蓝色。 步骤: 结果: 阳性菌——紫色 阴性菌——红色 结晶紫初染 碘液媒染 乙醇脱色 番红复染 涂片固定 由丹麦医生Hans Christian Gram于1884年创立。 革兰氏染色法(Gram Stain) Figure 1 - A Gram stain of Gram + Staphylococcus cells. Figure 2 - Gram stain of Gram - E. coli cells Figure 染料 ①碱性染料(basic dye)—带正电染料。其阳离子部分为发色基团,可与细胞中带负电的组分结合。如Crystal violet, Safranin, Methylene blue等。 ②酸性染料(Acid dye)—带负电染料。其阴离子部分为发色基团,可与细胞中带正电的组分结合。如Eosin, Congo red , Acid fuchsin 等。 ③脂溶性染料—如Sudan black。 多数染料都是中性有机盐。据着色基的不同可分为以下类型: 四、细菌的繁殖 一般为无性繁殖,二分裂法。 同形裂殖:裂殖后形成的子细胞大小相等。 异形裂殖:分裂产生两个大小不等的子细胞。 细菌分裂过程: ①菌体伸长,核质体分裂 ②形成横隔壁 ③子细胞分离 无性繁殖 有性繁殖 ☆少数有菌毛的菌可进行有性繁殖 方式 五、细菌的群体形态 ▲固体培养时的群体形态: ① 菌落(colony) ②单菌落(clone) ③菌苔(lawn) culture plate ▲液体培养时的群体形态: (一)种类: 不同的微生物种类,其菌落特征不同。同一种菌在不同培养条件下菌落特征也不尽相同。菌落的特征包括: (二)菌落形态 1、大小 2、颜色 3、透明度 4、表面状态 5、质地 6、边缘形态 7、隆起形状(正面观) Samples were taken from the numbered colonies and examined microscopically (三)影响菌落形态的因素 各种微生物在一定条件下形成的菌落,其形态特征有一定的稳定性和专一性,因而可以作为识别、鉴定菌种的一个依据,但也受某些因素的影响,观察时应加以注意。 1、邻近菌落 2、培养时间 3、培养基成分 4、培养温度 细菌菌落的特征 一般都较小,菌落与培养基结合不紧密,用接种针容易挑起,多数表面较光滑、湿润、较粘稠,易挑取,质地均匀,色泽多样。 染色:细菌细胞小而透明,为便于观察必须增加反差,因此要对细菌进行染色;染色还有助于检测细菌细胞的一些结构和生理特点,可以用于鉴别细菌种类。 正染色—染料与细胞结合而进行染色的过程; 负染色—细胞不染色而使背景染色的过程。 Gram Stain Bacteria are classified into two groups based on the nature of the outermost layers of the cell wall. The gram stain is a diagnostic tool used in identification. One group of bacteria have an outermost cell wall which is usually thick and comprised of peptidoglycan (gram positive). The other has a thin peptidoglycan outer layer and an outer membrane comprised of lipopolysaccharides (gram negative). The gram stain procedure* is detailed elsewhere online. This page was last updated on January 10, 1999. Send comments or questi
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