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【2017年整理】实验一 鱼病检查
实验一、疾病常规检查方法与诊断
一、实验目的
通过对本实验课的学习,了解常规的肉眼检查和显微镜检查疾病的方法,对检查结果进行分析、比较,做出疾病诊断。
二、实验材料
活的或刚死的病鱼。
三、实验用具、药品
显微镜、实体镜、载玻片和盖玻片、培养皿、剪刀、镊子、解剖刀、蒸馏水等。
四、实验方法
1.体外检查
( 1) 肉眼检查:观察鱼有无患病症状,有无大型寄生虫,对出现部位、寄生虫的种类、数量等情况作好记录。
( 2)显微镜检查:对鱼体表主要部位,如鳃、鳍、体侧等刮取少量黏液或用剪刀剪下少量鳃、鳍组织,放在滴有一滴蒸馏水的载玻片上,加盖玻片后在显微镜下检查,并做好记录。
2.体内检查
实质器官如肝、肾等组织器官切下一小块,放在干净的两块载玻片之间挤压,组织压碎后移开一块载玻片,在有压碎的组织的载玻片上加一滴水后,加盖盖玻片,在显微镜下观察,并做好记录。
3.检查顺序
( 1)体表粘液:肉眼检查鱼体的两侧以及各鳍,除了肉眼可见的病原体及其孢囊外,其中如原虫、吸虫囊蚴等可用解剖刀将体表粘液刮下进行镜检。
( 2)鳍:将各鳍拉开,目检,或将鳍全部剪下置载玻片上逐个进行镜检。
( 3)鼻腔:先用肉眼观察是否有大型寄生虫或患病症状,然后用吸管从鼻孔里吸取少许内含物镜检。
( 4)鳃:包括鳃的外观形态、颜色,刮取鳃粘液或取鳃丝镜检。鳃的颜色和种种病象,并把详细观察情况记录下来(左右两侧鳃要分别说明),肉眼检查完毕,再用小剪刀取一小块鳃组织(检查左右第一、二两片),放在已滴入有适当清水的载玻片上,盖上盖片迅速进行镜检。检查原生动物后,可把整个鳃放在培养皿里,加入清水,将整个鳃瓣逐片剪下,在解剖镜下观察。观察时用两根解剖针,把鳃丝逐条挑开,仔细观察。或用镊子把每片鳃片上的粘液完全刮下检查。
( 5)血液:检查血液可从鳃动脉﹑心脏和尾动脉取血,根据不同要求采取不同的方法。从心脏取血:两鳃盖之间的鱼体腹面及狭处的下方为围心腔将此处的鳞片除去,用小剪刀将皮肤剪开一个小口,再用微吸管插入心脏,即可吸取血液。血液可用涂片和置于培养皿用生理盐水稀释后分别进行镜检。
( 6)吸口腔:经肉眼检查后,再用镊子刮取上下颚一些粘液,进行镜检。
( 7)体腔:首先将鱼剖开,注意避免将腹腔里面的肠或其他器官剪破,体腔内器官显露出来时不要急于把内脏取出或弄乱。首先要仔细观察显露出来的器官,有无可疑的病象,或有否大型寄生虫。如果发现有白点,可能是粘孢子虫或其他寄生虫。肉眼检查完毕,把腹腔液用吸管吸出镜检,接着把整个内脏放在解剖盘上,将器官逐个分开,依次进行检查。
( 8)脂肪组织:用压碎法把脂肪组织压薄后检查。
( 9)肠道:将肠的外壁上所有的脂肪组织,尽量刮除干净,否则在检查时,许多脂肪油滴混进肠的内含物里,会妨碍观察。除干净脂肪组织后,把肠前后伸值,检查前、中、后三段。
( 10)肝、脾、胆囊、心脏、鳔、肾、膀胱、性腺、眼、脑、骨髓、肌肉等,应先用肉眼检查,以后再用压碎法进行镜检,并固定和保存标本。
五、病鱼的检查诊断原则
先肉眼后镜检、先外后内、先腔后实
六、检查时应注意事项
1.具有典型症状的活鱼或刚死的鱼。
2.鱼病检查诊断原则:先肉眼后镜检、先外后内、先腔后实。
3.检查的鱼体,解剖所取出的内部器官,必须保持湿润。
4.检查时要按顺序进行,小心操作。解剖过程中应保持器官的完整,避免混淆和污染,影响诊断的正确性。
5.为了防止通过器械污染,每一器官接触的用具须洗净后,再使用。
6.一时不能诊断的病象,要注意保留标本。
七、实验问答
1.病鱼检查中应注意哪些事项?为什么?
2.在主要器官检查的过程中,发现了哪些病原体,登记到鱼病检查记录表中。
3.对检查结果进行分析、比较做出诊断。
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