第13章核酸生物合成.ppt

第一节 DNA的生物合成 中心法则（ central dogma） 一、DNA复制（replication） 半保留复制semiconservative replication DNA半保留复制的实验 复制方向 半不连续复制 （二）参与DNA复制的主要酶类 解旋、解链酶类 DNA拓扑异构酶 解链酶 单链结合蛋白 引物酶 DNA聚合酶 DNA连接酶 1、解旋、解链酶类 2、引物酶(primase) 3、DNA聚合酶（DNA polymerase) DNA复制高保真性的机制 4、DNA连接酶(DNA ligase) （三）DNA的复制过程 DNA复制示意图 DNA复制的起始 2、有9个蛋白和酶参与复制的起始 DnaA蛋白 识别原点顺序在特定位点上打开DNA双链 DnaB蛋白 DNA解螺旋 DnaC蛋白 帮助DnaB蛋白 与原点结合 HU 刺激复制起始 引物酶DnaG蛋白 合成RNA引物 SSB 结合单链DNA RNA聚合酶 促进DnaA蛋白激活 DNA旋转酶 释放解螺旋时产生的张力 Dam甲基化酶 甲基化原点的5GATC序列 B、三个富含A=T的序列13bp重复序列被变性 3、SSB 结合单链DNA SSB 结合单链DNA，防止分开的DNA单链重新缔合。防止分开的DNA单链被DNA酶水解。 4、 DNA旋转酶释放解螺旋时产生的张力 5、形成复制叉 在原点处通过解旋、解链和SSB蛋白的结合等过程形成复制叉。 DNA新链的延伸 1、引发—RNA 引物的合成 在引发体（引物酶、DnaG的作用下）在原点处合成一小段RNA引物（10-60个碱基），然后由DNA聚合酶Ⅲ合成DNA链。前导链合成一个引物，滞后链断续合成多个引物。 2、DNA新链的延伸 3、引物的消除和缺口的补充 4、DNA片段的连接 DNA复制的终止过程 1、终止区域 大肠杆菌DNA上存在多重拷贝的 中止子(Terminator) 序列,这种Ter序列长约22bp,包括TerA、 TerB、 TerC、 TerD、 TerE 和TerF，它们在DNA上排列以创造出一种“陷阱”,阻止复制叉的移动。防止过分复制。 2、当任意一个复制叉碰到一个功能性Tus-Ter（与Ter结合的蛋白质称为Tus）复合物时，就停止。而另一个复制叉碰到第一个被阻止的复制叉时也停止前进。这些大复合物中间的几百个核苷酸对以一种未知的机制被复制。完成两个环行染色体的拓扑学联系。分开这种连环需要拓扑异构酶Ⅳ。 二、逆转录 逆转录过程 三、DNA损伤（突变）与修复 （一）引起突变的因素 （二）突变的类型 点突变(point mutation) （ 错配） 转换(transition) ：A ? G 或 C ? T 颠换 (transversion)：嘌呤碱 ? 嘧啶碱 框移突变(frameshift mutation) 缺失、插入1个碱基 重排(rearrangement) （三）DNA的损伤修复 错配修复 直接修复 切除修复 重组修复 SOS修复 直接修复 切除修复 重组修复 第二节 RNA的生物合成（转录） 一、参与转录的主要物质 转录模板 RNA聚合酶 底物 终止因子 （一）转录模板 转录的模板：DNA双链中的一条 模板链：DNA双链中具有转录功能的一条链（template strand） 编码链：贮存有遗传信息与模板链互补的一条链（coding strand） 不对称转录 （二）RNA聚合酶——原核细胞 （二）RNA聚合酶——真核细胞 （三）底物 二、转录过程 转录起始(transcription initiation) 转录起始动画 2、转录延长(transcription elongation) RNA链的延伸图解 3、转录终止（transcription termination） 转录全过程 真核生物和原核生物转录的差别 原核生物中rRNA前体的加工 tRNA前体分子的加工 酵母酪氨酸tRNA前体的加工 真核细胞mRNA前体的加工 DNA和RNA生物合成的比较(1) DNA和RNA生物合成的比较(2) DNA和RNA合成的比较 依赖与ρ因子的终止 DNA 核 核糖体 新生蛋白质 真核生物 原核生物 mRNA前体 转运 加工 mRNA mRNA ? 真核生物中转录与复制在不同的区域 ? RNA聚合酶不相同 ? 启动子不同 ? 转录后RNA加工修饰不同 三 转录后加工 rRNA加工 tRNA加工 mRNA加工 甲基化作用 专一核酸外切酶 30S前体 17S tRNA 25S 专一核酸外切酶 16S rRNA tRNA 23S rRNA 5