第5章 紫外-可见吸光光度法.pptVIP

影响准确度的因素 测量条件的选择 参比溶液的选择 吸光光度法分析条件的选择 酸度的选择 酸度的选择 显色剂的用量 温度的选择 蛋白质含量测定（氨基酸测定） 核酸测定 酶及微生物代谢研究 对摩尔系数的理解二 对同一种待测物质，不同的方法具有不同的 κ ，表明具有不同的灵敏度。 例：分光光度法测铜 铜试剂法测 Cu κ426 = 1.28?104 L?mol-1?cm-1 双硫腙法测 Cu κ495 = 1.58?105 L?mol-1?cm-1 一般情况 κ 104 κ : 104 ~105 κ 105 低灵敏度 中等灵敏度 高灵敏度 仪器测量误差 吸光定律 根据误差传递公式，有 又 得 浓度测量的相对偏差 令 得 T = 0.368 = 36.8 % A = 0.434 时，仪器测量误差最小 10 8 6 4 2 0 20 40 60 80 0.7 0.4 0.2 0.1 A T/% Er (36.8) 0.434 浓度测量的相对误差与T(或A)的关系 实际工作中，应控制T在10～70％, A在0.15～1.0之间 (调c, b, ?) § 5-4 实验条件的选择 测量条件； 分析条件； 测量波长的选择 无干扰，选择测量 ?max 有干扰 A ? A ? 待测溶液吸光度的选择 控制 A = 0.2 ~ 0.8 T = 65% ~ 15% 方法