甘露糖处理对康乃馨的切花花瓣衰老的影响.doc

甘露糖处理对康乃馨切花花瓣衰老的影响 1 前言 鲜切花是花卉产业的重要组成部分，采后保鲜是鲜切花产业发展面临的关键性技术问题。为使鲜花持久展示其诱人的色泽和美丽，必须对其进行保鲜处理。目前鲜花保鲜技术是制约花卉市场发展的瓶颈所在，对其进行研究是提高花卉市场中鲜花的品质和市场竞争力的关键。鲜花保鲜是一个潜在的市场，通过保鲜处理的鲜花，品质也可以得到相应的改善和提高，可以保持长时间的挺直新鲜[1]。随着花卉市场的不断发展，鲜花保鲜技术必然成为一个长期存在而又必需的部份，同时也将推动中国鲜切花市场的发展。 到目前为止，国内外不少学者对鲜切花衰老机理进行了多方面的研究，各种物理、化学、生物等不同的保鲜技术也应用于实际的生产流通贮藏当中。 物理保鲜方法主要有低温贮藏、减压贮藏、气调贮藏、辐照处理等。 化学保鲜是现代保鲜技术中普遍采用的技术。目前应用的化学保鲜类试剂主要有杀菌剂、无机盐、乙烯抑制剂、植物生长调节剂等。 由于化学保鲜法存在重金属和化学污染等问题，因此生物保鲜技术的发展就受到人们的期待。目前主要应用的技术有壳聚糖护色保鲜、糖类保鲜法、竹醋液保鲜法等。生物保鲜法是近年来新发展起来的最具有前景的保鲜方法[2]。 随着生物保鲜法研究的逐渐深入，各类生理物质的保鲜研究不断有报道，而甘露糖切花保鲜的研究报道却甚少。甘露糖能够抑制植物代谢的作用已得到充分证实，并且具有延迟果实后熟等作用[3~4]，同时也是某些植物转基因安全筛选体系的筛选剂[5~8]，因此推测甘露糖对鲜花应具有保鲜作用，在找出最佳保鲜效果的甘露糖浓度的基础上，本研究跟踪测定在该浓度下鲜切花花瓣的生理生化指标变化，以确定甘露糖预处理在切花衰老过程中是否具有保鲜作用。 2 材料与方法 2.1 材料 大红色康乃馨，统一从广州市岭南花卉批发市场购买 2.2 试验设计 配制浓度各为3%、5%、10%的甘露糖溶液，将康乃馨花枝剪成15cm长，之后插入上述溶液中进行常温脉冲处理，对照为去离子水处理。两处理花朵数为19枝，时间为16h。脉冲处理结束后，切取花茎长度为4cm的康乃馨花枝，置于去离子水中瓶插。从切花瓶插之日起，观察花朵萎蔫情况，并每隔1d定时用游标卡尺记录花朵最大直径（简称花径）。从形态观测结果得出能延缓切花衰老的最适甘露糖溶液浓度。用该浓度的甘露糖溶液对康乃馨切花进行脉冲处理及瓶插试验（两处理花朵数各为63朵），方法同上。 观察期内，用温度计分别定时测量室温和水温，保持环境的一致性。每隔2d 进行各生理生化指标的测量，每个处理进行3 次重复即测量3朵花，结果取平均值。 2.3 测定指标 2.3.1 瓶插寿命 计算保鲜天数，从瓶插开始，每天观察外部形态指标，当花失水萎蔫或发生“垂头”现象，即作为瓶插寿命结束的标志。 2.3.2 可溶性蛋白含量的测定 用考马斯亮蓝G-250法[9]测定蛋白质含量。 称取花瓣0.5g放入研钵中，加入2ml蒸馏水和少许石英砂研磨，磨成匀浆后用6ml蒸馏水分次洗涤研钵，洗涤液收集在同一离心管中，在4000r·min-1下离心10min，弃去沉淀，上清液转入容量瓶，以蒸馏水定容至10ml，摇匀后待测。 吸取样品提取液0.1ml，放入具塞刻度试管中（设两个重复管），加入5ml考马斯亮蓝G-520试剂，充分混合，放置2min后，在595nm下比色，记录吸光度值，通过标准曲线查得蛋白质浓度（μg·ml-1），以蒸馏水做空白。结果计算： 样品蛋白质含量（μg·g-1鲜重）= C×V/W 式中，C为查标准曲线所得每管蛋白质浓度，μg·ml-1；V为提取液总体积，ml；W为样品质量，g。 2.3.3 丙二醛含量的测定 用硫代巴比妥（TBA）0.5g花瓣样品，加5％TCA（三氯乙酸）5ml，研磨后所得匀浆在3000r·min-1下离心10min，上清液备用。吸取1.5mlMDA提取液于刻度试管中，加入2.5ml 0.5％巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液，于沸水浴上加热10～15min，迅速冷却。于1800g离心10min。取上清液于532nm、600nm波长下测定光密度，以蒸馏水调零。结果计算： 丙二醛含量（nmol·g-1）=（OD532-OD600）×A×V/a 1.55×10-1×W 式中，A为反应液总量，（4ml）；V为提取液总量，（5ml）；a为测定用提取液量，（1.5ml）；W为材料重，g；1.55×10-1为丙二醛微摩尔吸光系数。 2.3.4 细胞膜透性的测定 用电导法[9]测定花瓣细胞膜透性。用直径1cm打孔器取样，为了减少伤口处物质外流的影响，需将花瓣小圆片用去离子水充分冲洗后再用滤纸吸干外附水备用。用天平准确称取0.5 g的花瓣小圆片对应放入已编号的三角瓶中，加入30ml的去离子水，在振荡器上浸泡2 h后，测定电导值。将测过电导率的各三