RPHPLC法测定兔血浆中黄芩苷含量.docVIP

RPHPLC法测定兔血浆中黄芩苷含量 　 【摘要】 反相高效液相色谱法； 黄芩苷； 血药浓度 【关键词】 反相高效液相色谱法； 黄芩苷； 血药浓度 毕业论文 　　Abstract:Objective A rapid sensitive RPHPLC method was developed to determine baicalin in the rabbits plasma. Methods The rabbits’ plasma was pretreated by precipitating with acetonitrile. DiamonsolTM C18 column was used. The mobile phase was consisted of methanol, water and phosphate（55∶45∶0.2). The flow rate was 1.0 mL/min, and the UV detection was set at 277 nm. Benzoic acid was used as internal standard. Results The linear calibration curves were obtained in the concentration range of 1~50μg/mL(r=09993). The withinday and betweenday RSD were within 2.8% and 4.0% respectively,relative recovery rate and extraction recovery rate were 95.5% and 62.3% respectively.Conclusions The method is simple, rapid and suitable for the determination of concentration of plasma and the study of pharmacokinetics. 论文代写 　　Key words:baicalin ; RPHPLC; concentration of plasma 　　黄芩苷是从唇形科植物黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）的干燥根提取所得的黄酮类物质，具有抗炎抗变态反应、抗微生物、解热、降压利尿、降血脂血糖、利胆解痉等作用［1～2］。黄芩苷是多种中药制剂的有效成分，因此建立黄芩苷的血药浓度测定 方法 ，具有重要意义。本文在 文献 ［34］基础上，进行测定条件优化，采用RPHPLC法，以苯甲酸为内标物测定家兔血浆中黄芩苷的含量，此方法具有简便、专属性强、准确及 应用 性强等优点，为 研究 其体内代谢提供方法依据。 　　1 仪器与药品　　 　　LC10A型高效液相色谱仪（日本岛津公司）；SPD10AVP紫外可见分光光度检测器（日本岛津公司）；HW2000色谱工作站。漩涡混合器(天津药典标准仪器厂)；高速台式离心机（上海安亭 科学 仪器厂）；超声波清洗器（天津恒奥超声波清洗器）。黄芩苷对照品（ 中国 药品生物制品检定所，批号:110715-200514），黄芩苷原料药（广州市亿深天然产物 科技 发展 有限公司），内标物苯甲酸为 分析 纯（天津市大茂化学试剂厂），甲醇、乙腈为色谱纯（天津市四友生物医学技术有限公司），试验用兔子（购于广东省卫生厅实验动物中心）。 　　2 方法与结果 论文代写 　　2.1 色谱条件 以文献［3］中色谱条件为基础改进，色谱柱为DiamonsolTMC18柱（250 mm×4.6 mm,ID,5 μm）；流动相：甲醇水磷酸（体积比55∶45∶0.2）；流速：1 mL/min；检测波长：277 nm；柱温：室温；进样量：10 μL。 论文代写 　　2.2 溶液的制备 毕业论文 　　2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品25 mg，置50 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，即得0.5 mg/mL 的黄芩苷对照品储备液。分别精密吸取黄芩苷对照品储备液0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL分别置10 mL容量瓶中，用重蒸水定容，配成5 、25、50、100、150、200、250 μg/mL的系列黄芩苷对照品标准溶液。 毕业论文 　　2.2.2 血浆样品处理取含有一定量黄芩苷的血浆0.4 mL至5 mL离心管中，加入重蒸水0.4 mL，内标物溶液（0.45 mg/L苯甲酸甲醇溶液）0.4 mL，乙腈0.8 mL，漩涡混合30 s，超声振荡5 mi