不同浙贝母栽培品种贝母素甲累积效果分析.docVIP

不同浙贝母栽培品种贝母素甲累积效果分析 被列为“浙八味”之首，历版《中国药典》均有收载，具有清热散结，化痰止咳的功能。目前市场上的传统中成药二母宁嗽丸、养阴清肺丸、橘红丸等均以浙贝母为主要原料。有研究表明，浙贝母不仅镇咳润肺作用良好，而且对呼吸系统、血液循环系统、中枢神经系统、抑制腺体分泌及散瞳等都有一定作用lt;supgt;[1]lt;/supgt;。浙贝母的有效成分为生物碱，其中贝母素甲为浙贝母镇咳的主要活性成分lt;supgt;[2]lt;/supgt;。贝母素甲为异甾体生物碱，该物质紫外吸收弱，而采用蒸发光散射检测器（ELSD）可以准确地检测lt;supgt;[3]lt;/supgt;。 　目前，在浙贝母生产上主要有狭叶种、宽叶种、多籽种及小三子4个栽培品种。其中以狭叶种浙贝母种植面积最广，并且于2007年通过新品种认定，定名为浙贝1号;宽叶种浙贝母于2014年被认定为浙贝2号。本研究采用HPLC-ELSD对浙贝母主栽品种的贝母素甲含量进行测定，以期为浙贝母的质量控制提供参考。 　1材料 　Waters Alliance 2695高效液相色谱仪，Waters ELSD-2420型蒸发光散射检测器。贝母素甲（peimine，批号110750-200609），由中国药品食品检定研究院提供。氯仿，二乙胺为分析纯，甲醇为色谱纯，水为超纯水。 　供试的4个浙贝母栽培品种均采自于浙江省鄞州区，分别为狭叶种、宽叶种、多籽种及小三子，由南京农业大学中药材研究所王康才教授鉴定为浙贝母F. thunbergii，栽培于镇江市丹徒区三明生物中药材种植基地。在浙贝母植株枯萎后，采收鳞茎，参照《浙贝母规范化生产标准操作规程》lt;supgt;[4]lt;/supgt;将采收得到的浙贝母鳞茎分级，40～80个/kg为1级，81～120个/kg为2级，121～280个/kg为3级，105 ℃杀青15 min，60 ℃烘干至恒重，部分鳞茎分成芯芽和鳞片2部分，备用。 　2方法 　2.1色谱条件色谱柱 Promosil Clt;subgt;18lt;/subgt;（4.6 mmtimes;250 mm，5 mu;m）;流动相 乙腈-水-二乙胺（70∶30∶0.03）;流速 1.0 mL·minlt;supgt;-1lt;/supgt;;柱温 25 ℃;进样量 20 mu;L;ELSD参数：飘移管温度75 ℃，载气流量 2.2 L·minlt;supgt;-1lt;/supgt;，色谱图见图1。 　A.对照品;B.样品;1.贝母素甲（对照品峰名）。 　图1贝母素甲HPLC图 　Fig.1HPLC chromatograms of peimine2.2对照品溶液制备精密称取贝母素甲对照品，加甲醇配制成含贝母素甲201.5 mg·Llt;supgt;-1lt;/supgt;溶液，摇匀，作为对照品溶液。 　2.3供试品溶液制备取本品粉末（过4号筛）2 g，精密称定，置圆底烧瓶中，加浓氨试液4 mL浸润1 h，加三氯甲烷-甲醇（4∶1）的混合溶液40 mL，称重，混匀，80 ℃水浴中加热回流2 h，放冷，再称重，加上述混合液补足损失，滤过。取续滤液10 mL，于蒸发皿蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至2 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。 　2.4样品含量测定分别精密吸取对照品溶液5，10，20 mu;L，供试品溶液10 mu;L，注入液相色谱仪，测定，以峰面积的常用对数为纵坐标，以对照品浓度的常用对数为横坐标作线性回归，分别得回归方程Y=1.584 1 X-0.059 2，R2=0.999 2，并计算各样品贝母素甲含量。 　3结果与分析 　3.1不同大小浙贝母鳞茎中贝母素甲含量的比较狭叶种、宽叶种、多籽种和小三子浙贝母大鳞茎的折干率分别较小鳞茎高1.32%，1.18%，1.08%，0.63%，见表1。表14个浙贝母栽培品种不同大小鳞茎折干率的比较（plusmn;s，n=5） 　Table 1Comparison of drying rate of different bulbs of 4 Fritillaria thunbergii cultivars（plusmn;s，n=5） 　栽培品种级别鲜重/g干重/g折干率/%狭叶种115.66plusmn;0.05 a4.96plusmn;0.02 a31.6428.76plusmn;0.06 d2.66plusmn;0.02 d30.32宽叶种114.58plusmn;0.02 b4.43plusmn;0.01 b30.4037.70plusmn;0.02 f2.25plusmn;0.01 f29.22多籽种211.98plusmn;0.04 c3.67plusmn;0.01 c30.6136