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腐烂苹果中的细菌分离以及理化性质的检测摘要：从腐烂苹果中取样培养细菌，用平板直线划线法分离纯化细菌，经扩大培养后进行镜检和革兰氏染色实验，最后对分离出的纯种细菌进行理化性质检测：细菌水解淀粉实验以及探究pH对细菌生长的影响实验。实验结果显示，腐烂苹果中的细菌形状小而圆，是革兰氏阳性菌；水解淀粉实验说明该细菌中没有水解淀粉的酶；分光光度法所得的数据显示该细菌的生长环境偏中碱性。关键词：腐烂苹果、细菌、平板直线划线法、革兰氏染色、水解淀粉、分光光度法Study the Bacteria of Rotten Applesin the Separation and Physical Chemical Properties Lin jia-wan(College of life science,South China Normal University, Guangzhou 510631,China )Abstract:Sample training bacteria from the rotten apples, and purify bacteria with flat linear crossed method; Afterexpanding the bacteria, they are tested by Microscopic examinationandGram staining, and finally,test physical and chemical properties oftheisolatedpure bacteria with Bacteria hydrolysis starch experiment and exploring the pH of the growth of the bacteria influence experiment.The experimental results show that the bacteriain rotten applesare small, round in shape,and are gram-positive;The experiment of the bacteria hydrolysis starch indicated that those bacteria don’t have enzyme that can hydrolyze amylum;Spectrophotometry income datas showed that those bacterialike to grow in the environment of alkaline slant.Key words:rotten apples;bacteria;Flat linear crossed method;Gram faerbung;hydrolyze amylum;Spectrophotometry引言：现今，市场的水果摊位仍会出售腐烂的水果，而有些人不清楚腐烂水果会滋生很多细菌，即使把腐烂的部分挖去，细菌也会蔓延到其它部分。例如苹果只要烂了一个小洞，其3厘米厚的果肉都已相应变质。食用后，轻则容易引起肠道不适、腹泻呕吐等，重则会患上痢疾或肠胃炎，甚至可能造成脱水休克。 因此，检测腐烂水果中腐烂果肉以及完好果肉的细菌性质的实验具有重要意义。1 材料与方法1.1材料以及试剂腐烂苹果2个、牛肉膏、蛋白胨、无菌水、结晶紫、碘液、95%乙醇、番红、NaCl、可溶性淀粉、琼脂、卢戈氏碘液、1mol/L HCL以及1mol/L NaCl(用于调节pH)1.2实验用具接种铲、接种环、超净工作台、平板培养皿、试管、酒精灯、酒精棉球、硅胶塞、显微镜、擦镜纸、载玻片、盖玻片、吸水纸、小滴管、牛皮纸、报纸、火柴、吹风筒、三角瓶、pH计、分光光度计、恒温摇床、手提式灭菌锅、移液枪、托盘天平1.3实验方法平板直线划线法、镜检法、革兰氏染色法、分光光度法2 染色以及理化性质实验原理2.1细菌的革兰氏染色实验原理先将细菌标本用结晶紫染色，再加媒染剂碘液（增加染料和细菌细胞的亲和力），使它和结晶紫在菌体细胞中形成分子量较大的紫碘复合物，然后用酒精进行脱色，最后用复染剂复红染色。假使细菌细胞不被脱色而保留初染紫颜色者，称为革兰氏阳性菌；若被脱色，而染上复染剂的红颜色者，称为革兰氏阴性菌。通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且