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- 2017-09-10 发布于福建
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决明子炮制前后化学成分变化探究
决明子炮制前后化学成分变化探究
【摘要】 目的研究决明子在炮制前后化学成分的整体变化,寻求炮制增效的物质基础,揭示炮制机理。方法取决明子生品和炮制品,分别用甲醇和水提取,将提取液进行高效液相色谱分析。比较决明子生品和炒制品醇提液和水提液的色谱图。结果决明子炒制品醇提液中,有1种原有成分消失,产生了2种新成分,同时有1种成分含量显著下降,有1种成分含量显著上升;决明子炒制品水煎液中,产生了3种新的成分,同时有3种物质的含量显著下降,有2种物质含量显著上升。在醇提液和水提液中都有同一种新成分产生。结论决明子炮制后缓和药物性能,增强疗效的物质基础很可能是药性猛烈的成分(蒽醌类)被部分破坏,含量减少或转变成了新的成分,因而缓和药性;同时炒制更利于一些成分溶出,其含量增加而致疗效增强。
【关键词】 决明子;高效液相色谱;化学成分;炮制
炮制是中药的一大特色[1]。中药炮制是根据中医药理论,依照辨证施治的需要和药物自身的性质以及调剂、制剂的不同要求所采取的一项制药技术。中药成分复杂,常常一药多效,但中医治病往往又不是要利用药物的所有作用,而是根据病情有所选择。这样就需要通过炮制对药物原有的性能予以取舍,权衡损益,使某些作用突出、某些作用减弱,即改变药物的性能,力求符合疾病的实际治疗要求。如降低或消除药物的毒性或副作用[2,3],改变或缓和药物的性能,增强药物的疗效等[4]。从现代科学角度来分析,中药炮制过程中疗效的提高、毒性的降低及药性的改变必然有其发生物质基础,这就应该是药物内部化学成分发生了变化,物质基础改变了,药性自然改变。多年来对中药的炮制作用的机理进行了大量研究,取得了很多重要成果[5,6]。例如马钱子的炮制作用研究,其制后的减毒作用是由于其内含有的毒性成分士的宁碱受高温破坏易分解,而使其毒性降低。再如大黄、附子、乌头、巴豆的炮制研究等等。但是以往的研究都是以中药中的有效成分或者毒性成分作为指标来探讨中药炮制的机理。中药的作用不仅与所谓的有效成分有关,与其他共存成分的关系也很密切。中药的毒性不仅与所谓的毒性成分有关,很可能也与其他成分有关。况且有些中药的有效成分或毒性成分尚不清楚。因此研究中药炮制的机理不仅仅应考虑某个成分或者某几个成分,而应该考虑整体成分,研究炮制对中药整体成分的影响,这样才能比较全面的评价炮制对中药活性、毒性、药性等方面的影响,揭示炮制的物质基础及其变化机理[7]。本项研究以决明子为例[8],应用高效液相色谱研究其炮制前后整体化学成分的变化,为中药炮制原理深入研究作方法学方面的探索,进而揭示中药炮制的科学内涵。《本经》曰:“决明,味苦性寒,可泄热;甘咸走血,可益阴”。可见生决明苦寒,甘咸,强于清泄肝火,又兼益肾阴,且其性质凉润,又有清热润通便之效。而决明子经炒制后寒泻,凉润之性大为缓和,清泄肝火,润肠通便之力减弱,而长于平肝养肾。
1仪器与材料
1.1仪器岛津LC-10A高效液相色谱仪,配二级管阵列检测器,色谱柱phenomenex C18(4.0 mm×25.0 mm,5μm )。
1.2试剂甲醇(色谱纯),美国Fisher公司,水为二次蒸馏水。
1.3药材饮片生决明子,炒决明子由西安市药品检定所谢志民研究员提供。其中炒决明子是其按照2005版《中国药典》炮制标准制备得到的。
1.4色谱条件色谱柱为phenomenexC18 ; 流动相为甲醇-水(1∶2); 流速0.8 ml/min; 检测波长230 nm(决明子); 柱温30℃。
2方法
2.1样品的提取与分析
2.1.1炒决明子醇提取样品精密称量炒决明子2 g,加入10 ml甲醇溶解,室温下放置2 h,再超声波振荡提取20 min,过滤、定容到10 ml容量瓶中备用(1号样品)。
2.1.2生决明子醇提取样品精密称量生决明子2 g,加入10 ml甲醇溶解,室温放置2 h,再超声波振荡提取20 min,过滤,定容到10ml容量瓶中备用(2号样品)。
2.1.3炒决明子水提取样品精密成取炒决明子2 g,加150 ml蒸馏水煮沸提取1 h,趁热过滤,减压浓缩至干。加适量甲醇溶解(必要时可用超声波振荡助溶)定容至10 ml容量瓶中备用(3号样品)。
2.1.4生决明子水提取样品精密称取生决明子2 g,加150 ml蒸馏水煮沸提取1h,趁热过滤,浓缩至干。加适量甲醇溶解(必要时可用超声波震荡助溶)。定容至10 ml,容量瓶中备用(4号样品)。将1~4号样品依次上高效液相色谱仪分析,色谱见图1~4。图1炒决明子醇提取样品色谱图图2生决明子醇提取样品色谱图
2.2目标成分的定性研究在上述实验的基础上,我们在1号样品(炒醇样
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