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制作浆膜腔积液细胞块最优方法探究 　　细胞块技术基本原理是将样品离心，使其中的细胞和微小组织块浓缩后固定，石蜡包埋后切片染色观察，下面是小编搜集的一篇探究制作浆膜腔积液细胞块方法的论文范文，欢迎阅读借鉴。 　　浆膜腔积液是临床中最为常见的一种体征，炎症和肿瘤是引起积液的主要原因。积液性质的诊断以往主要通过涂片进行，但是由于常规涂片法存在涂片厚、细胞重叠、结构不清、细胞量少、阳性检出率低等缺点[1-2],使得诊断的敏感性仅为50%~78%[3].细胞块技术基本原理是将样品离心，使其中的细胞和微小组织块浓缩后固定，石蜡包埋后切片染色观察。细胞块通过石蜡包埋后类似组织块，可以连续切片及永久性保存标本，弥补了传统涂片的不足，还可以进行进一步相关检测。关于细胞块技术的应用在文献中可见零星报道，制备方式也各异，本研究通过对比四种浆膜腔积液细胞块制作方法，试图找到一种更适合基层医院推广开展的细胞块制作方法。 　　1材料与方法 　　1.1材料收集桂林医学院附属医院2010-2012年间的浆膜腔积液标本80例，积液量50~200ml,其中胸腔积液53例，腹腔积液27例，样本包含略浑浊的积液35例为第一组;血性积液或浑浊的积液45例为第二组。 　　1.2方法把每例样本分作4份，按下列步骤进行操作：所有样本在一次性10ml塑料试管中离心2000r/min,离心5min,之后将沉淀部分做以下处理①将试管内上清液去除，加入适量95%乙醇之后再次离心2000r/min、5min,去除上清液之后，用手术剪在距试管底部沉淀物上方0.1~0.2cm处剪去上段试管，再将试管底部剪出一个小口子，便于脱水剂穿透。将装有沉淀物的试管底端用拭镜纸包好后放入包埋盒中(试管包埋法).②将试管内上清液去除，尽可能用镊子将在底部的沉淀物取出，用拭镜纸包好后放入包埋盒中(普通离心沉淀法).③将试管内上清液去除，用滤纸尽可能吸去多余水分，在其中加入人血清液混匀后再次离心，取沉淀物用拭镜纸包好后放入包埋盒中。④将试管内上清液去除，用滤纸尽可能吸去多余水分，在其中加入适量融化的琼脂混匀，待冷凝固后，取出沉淀物放入包埋盒中。以上4种细胞块制作完成后，均放入95%乙醇中固定1h,经过常规脱水透明，包埋，HE制片。 　　1.3结果判定 　　1.3.1成功率判定细胞沉渣能够制作成细胞块，沉渣大部分能够聚拢在2cmtimes;2cm的范围内，并能够制成切片就认定为制作细胞块成功，可以允许有一些沉渣散落。 　　1.3.2细胞块完整性判断细胞蜡块制成后，细胞保留完整，结合性较好，几乎没有或及有少量的散落细胞，能够完整制片，即为具有完整性。 　　1.4统计学分析所得数据，应用SPSS15.0统计软件进行处理，各组间比较应用chi;2检验。 　　2结果 　　2.1细胞块制作成功率对比 　　2.1.1第一组35例略浑浊的浆膜腔积液经统计学处理，35例略浑浊的浆膜腔积液细胞块制作的4种方法成功率差异有统计学意义(chi;2=27.47,Plt;0.01).其中试管包埋法与普通离心沉淀法、血清凝聚法，普通离心沉淀法与琼脂凝聚法、普通离心沉淀法与血清凝聚法成功率的差异均有统计学意义(chi;2=21.25、4.79、16.73、6.94,Plt;0.01或lt;0.05);而试管包埋法与琼脂凝聚法，血清凝聚法与琼脂凝聚法制作成功率差异无统计学意义(chi;2=0.40、2.52,Pgt;0.05).(表1,图1,图2) 　　2.1.2第二组45例血性或浑浊的浆膜腔积液经统计学处理，45例血性或浑浊的浆膜腔积液细胞块制作成功率的差异均无统计学意义，其中普通离心沉淀法与试管包埋法、血清凝聚法、琼脂凝聚法成功率的差异均无统计学意义(chi;2均为3.10,Pgt;0.05).(表2,图3,图4) 　　2.2细胞块制做完整性对比四种方法制作成功的所有细胞块包括：试管包埋法75例，普通离心沉淀法53例，血清凝聚法67例，琼脂凝聚法73例。 　　经统计学处理，细胞块制作的4种方法完整率差异有统计学意义(chi;2=64.17,Plt;0.01).其中试管包埋法与普通离心沉淀法、血清凝聚法;普通离心沉淀法与血清凝聚法、琼脂凝聚法;血清凝聚法与琼脂凝聚制作方法完整率的差异均有统计学意义(chi;2值=39.63、3.97、20.32、41.23、4.91,Plt;0.01或Plt;0.05);而试管包埋法与琼脂凝聚法制作完整率差异无统计学意义(chi;2=0.07,Pgt;0.05)(表3). 　　3讨论 　　传统涂片中细胞量少、涂片重叠、需要观察范围很大，容易导致漏诊，而且对于细胞形态不典型的间皮细胞、转移癌细胞，尤其是对散在的癌细胞的鉴别时常很困难。文献报道有高达12%的病例会遇到间皮细胞与癌细胞难以鉴别的状况[4].这种