加减葛花解酲汤对大鼠酒精性肝损伤防治作用.docVIP

加减葛花解酲汤对大鼠酒精性肝损伤防治作用 　【摘要】 　　目的通过观察加减葛花解酲汤对慢性酒精性肝损伤大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)的影响,探讨其对慢性酒精性肝损伤的防治作用。方法采用白酒灌胃的方法建立慢性酒精性肝损伤动物模型,以益肝灵、葛花解酲汤为对照,给予加减葛花解酲汤高、低剂量药物治疗后检测各组大鼠血清ALT、GSH含量。结果模型大鼠血清ALT含量较正常组显著增高（Plt;0.01）,GSH含量较正常组显著降低（Plt;0.01）；给药各组血清中上述指标较模型组有较明显的改善（Plt;0.01或Plt;0.05）。结论加减葛花解酲汤可通过保护酒精引起的慢性肝细胞损伤，抑制肝组织内ALT的升高,并能同时提高GSH活性,增加GSH的含量,对抗过氧化反应,从而达到防治慢性酒精性肝损伤的作用，且疗效优于益肝灵与葛花解酲汤。 【关键词】 酒精性肝损伤 加减葛花解酲汤 大鼠 血清丙氨酸氨基转移酶 谷胱甘肽过氧化物酶 加减葛花解酲汤主要由葛花、葛根、枳椇子、党参、白术、茯苓、泽泻、茵陈、虎杖、大黄、丹参、山楂等药组成,经临床验证对慢性酒精性肝病有较好的防治疗效。为了进一步验证其防治作用及其药效,以益肝灵、葛花解酲汤为对照，分别观察了加减葛花解酲汤对慢性酒精性肝损伤大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)的影响,借以了解其对慢性酒精性肝损伤的治疗作用。 　　1 材料 　　1.1 动物与分组选取SD大鼠60只, 雄性，体重180～200 g,清洁级，由广西中医学院实验动物中心提供。 　　1.2 药物与试剂加减葛花解酲汤、葛花解酲汤用广西中医学院附属第一医院韩国煎药机制作, 加减葛花解酲汤低剂量(等效剂量)含生药2.57 g/ml,加减葛花解酲汤高剂量含生药12.51 g/ml,葛花解酲汤(系解酒之古方,其组成与剂量按《兰室秘藏》,该方由木香、人参、猪苓、茯苓、橘皮、白术、干姜、神曲、泽泻、青皮、砂仁、白豆蔻、葛花组成)含生药1.63 g/ml；益肝灵由北京市第四制药厂生产；ALT、GSH试剂盒由南京建成生物研究所提供；56度红星二锅头白酒由北京红星二锅头酒厂生产。 　　2 方法 　　2.1 动物分组与造模将60只SD大鼠随机分成6组,每组10只,即正常组、模型组、益肝灵组、葛花解酲汤组(简称葛汤组)、加减葛花解酲汤高剂量组(简称加减高组)、加减葛花解酲汤低剂量组(简称加减低组)。正常组自由进食、饮水，每天下午给予等体积的等渗盐水灌胃；其余各组均参考文献［1］,用红星二锅头（约为10.2 mol/L酒精溶液）平均以1.5 ml/100 g的剂量每日早晨灌胃1次，连续灌胃8周。造模同时，益肝灵组、葛汤组、加减低组、加减高组分别按0.03，11.4，15.8，83.6 g/kg的剂量灌胃给药。模型组给等体积的等渗盐水灌胃。 　　2.2 指标测定全部大鼠于8周后处死，剖杀前12 h禁食,不禁水。于末次给药后24 h麻醉,腹主动脉取血,3 500 r/min离心15 min后制备血清,按要求保存待检。ALT、GSH,按试剂盒说明书用比色法测定。 　　2.3 统计学方法运用SPSS10.0统计软件进行单因素方差分析，组间比较采用q检验。 　　3 结果 　　3.1 动物一般状况观察实验过程中，除正常组外，其余各组大鼠被毛松散蓬乱，毛色枯黄，精神差，活动少，且反应迟钝，尿色偏黄，大便稀软不成形，体重与正常组相比增长较慢。其中模型组大鼠经白酒灌胃后,出现嗜睡或烦躁状态，毛色渐无光泽,体重明显比正常组低,精神萎靡不振,食量明显减少。而加减高组、加减低组、葛汤组及益肝灵组一般状况优于模型组,尤其是加减高组的大鼠状态随用药时间延长而明显改善。实验过程中模型组大鼠死亡2只，1只因灌胃时白酒误入气管立即死亡，1只死于胃扩张；葛汤组死亡1只，原因不明；加减低组死亡1只，死于胃扩张穿孔。 　　　3.2 病理检查结果模型大鼠光镜病理显示肝正常组织结构消失,小叶界限不清,细胞索紊乱,大部分肝窦消失；肝细胞广泛性的空泡变性,部分肝细胞呈典型的气球样变；多数细胞核体积缩小、深染,核膜轻度皱缩,可见少量灶性或点状坏死。显示肝损伤已经形成,并且造模大鼠仅有小部分死亡，说明灌酒量较为适中,从而保证了实验结果对评价药物疗效的可信性。 　　3.3 各组血清ALT、GSH检测见表1。表1 各组大鼠血清ALT，GSH含量比较（略）与正常组比较，*Plt;0.01； 与模型组比较，■Plt;0.01，◆Plt;0.05；与葛汤组比较，▲Plt;0.01；与益肝灵组比较，△Plt;0.01； 与加减低组比较，★Plt;0.01 由表1可见,模型组血清ALT较正常组明显升高,GSH较正常组明显降低,具有显著性差异(Plt;0.01)；