反相高效液相色谱法测定酸枣仁颗粒中酸枣仁皂苷A及酸枣仁皂苷B.docVIP

反相高效液相色谱法测定酸枣仁颗粒中酸枣仁皂苷A及酸枣仁皂苷B 　 作者：周庆武，李玲玲，纪标，徐垣义 【摘要】 　　目的 建立酸枣仁颗粒中酸枣仁皂苷A与酸枣仁皂苷B的含量测定方法。方法反相高效液相色谱法 ，采用Hypersil C18柱为分析柱 ，使用以乙腈和水为流动相的二元梯度洗脱方法，检测波长为201 nm ，流速为1 ml·min-1。结果酸枣仁皂苷A在50.01～198.2 μg·ml-1与峰面积呈良好的线性关系 (r=0 .999 8,n =5) , 平均回收率为99.41%；酸枣仁皂苷B在66.25～209.0μg·ml-1与峰面积呈良好的线性关系 (r =0.999 8,n =5 )，平均回收率为 99.34 %。结论 该法简便、快速、重现性好 ，适用于酸枣仁颗粒中酸枣仁皂苷A与酸枣仁皂苷B的定量分析。 【关键词】 反相高效液相色谱法； 酸枣仁皂苷A； 酸枣仁皂苷B； 酸枣仁颗粒 　　Abstract:ObjectiveTo develop a method for the determination of Jujubaside A and Jujubaside B in Ziziphus jujuba Mill(ZJM) Granules. MethodsAn RP-HPLC method was set up with Hypersil 18 column.The mobile phase consisted of acetonitrile and water, and a gradient elution program was applied. The DAD detector was set at 201 nm. ResultsThe calibration curve of Jujubaside A was linear in the range of 50.01～198.2 μg·ml-1,the average recovery was 99.41%;the calibration curve of Jujubaside B was linear in the range of 66.25～209.0μg·ml-1,the average recovery was 99.34%.ConclusionThe method is appropriate for the determination of Jujubaside A and Jujubaside B. 　　Key words:RP-HPLC; Jujubaside A； Jujubaside B; Ziziphus jujuba Mill(ZJM) Granules 酸枣仁颗粒是由酸枣仁、茯苓、知母等药材组成，具有养心安神、镇静催眠之功效。其中酸枣仁为方中君药，酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B为酸枣仁镇静催眠的主要成分［1，2］。本品采用RP-HPLC法对酸枣仁颗粒中酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B进行含量测定，获得满意效果，为该制剂的质量控制提供了快速准确的方法。 　　1 仪器与试药 美国安捷伦1100高效液相色谱仪；梅特勒-托利多AG-285电子分析天平；江苏金坛宏凯仪器厂79-1电磁搅拌仪。 酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B对照品（成都思科华生物技术有限公司，纯度gt;98%，供含量测定用）；酸枣仁颗粒：扬子江药业集团上海海尼药业有限公司，批号04051501乙腈为色谱纯，购自Sigma；甲醇、乙醚等均为分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司；纯净水自制。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件色谱柱为Hypersil ODS C18型色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）；流动相：最初7 min为乙腈-水(28∶72)，7～13 min内乙腈浓度梯度上升为35%，维持至22 min，22～25 min内乙腈浓度上升为45%，35 min结束，20 min平衡。流速：1.0 ml·min-1；检测波长201 nm；柱温25℃。数据处理方法：外标峰面积法。理论塔板数按酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B计不得低于2 500。 　　2.2 溶液的制备 　　2.2.1 对照品溶液 　　分别精密称取酸枣仁皂苷A对照品和酸枣仁皂苷B对照品适量，置10 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每毫升含0.15 mg酸枣仁皂苷A和0.15 mg酸枣仁皂苷B的溶液，摇匀，0.45 μm微孔滤膜滤过，弃去初滤液，续滤液作为对照品溶液。 　　2.2.2 供试品溶液精密称取本品7.5 g，置烧杯中，加5%的氢氧化钠溶液50 ml使之完全溶解，并全部转移至分液漏斗中，乙醚脱脂3次，30 ml/次，弃去乙醚层，下层液挥尽乙醚后