哮喘灵雾化吸入对哮喘大鼠IFNγ、 IL4及IgE水平影响.docVIP

哮喘灵雾化吸入对哮喘大鼠IFNγ、 IL4及IgE水平影响 　 作者：王清峰, 殷银霞, 郑天珍, 吴玉泓, 赵彬元, 周智辉 【摘要】 　　目的: 探讨哮喘灵雾化吸入对哮喘鼠血清中IFNγ、 IL4 和IgE水平的影响及其可能机制。方法: 建立Wistar大鼠哮喘模型, 哮喘灵（27.84 g/kg、 13.92 g/kg）雾化吸入治疗7 d, 用放射免疫法测定血清中IFNγ、 IL4及IgE的含量。结果: 与模型组比较, 哮喘灵治疗组大鼠血清IFNγ水平升高（Plt;0.05）、 IL4和IgE水平下降（Plt;0.01）, 且药物治疗组大鼠的哮喘症状得到缓解, 引喘潜伏期明显延长。结论: 哮喘灵可通过调节哮喘鼠IFNγ、 IL4和IgE的水平而起到治疗哮喘的作用。 【关键词】 哮喘灵 雾化吸入 哮喘 IFN γ I 4 IgE 　　支气管哮喘是以嗜酸性粒细胞、 淋巴细胞等浸润为主的气道慢性变态反应性炎症, 由于T淋巴细胞调控着其他炎性细胞的功能, 因此T淋巴细胞的活化对哮喘的发生、 发展起关键作用[1, 2]。中药气雾剂在治疗呼吸系统疾病方面具有明显优势和广泛前景[3]。我们观察哮喘灵经超声雾化吸入对哮喘鼠的治疗作用及血清中IFNγ、 IL4及IgE水平的影响; 进一步为哮喘灵气雾剂的开发和应用提供理论基础。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 健康SPF级Wistar大鼠40只(雌雄各半, 体质量180～220 g), 由甘肃中医学院动物实验中心SPF实验室提供, 合格证号SCXK(甘)2004-0006。均以标准饲料喂养, 自由饮水。哮喘灵药液由桂枝、 白芍、 杏仁 、 厚朴、 甘草、 大枣、 生姜、 葶苈子等组成, 由甘肃中医学院科研实验中心采用水提醇沉法制备而成（1 L成药含生药4040 g）。蛤蚧定喘胶囊, 三金生物药业有限责任公司产品（批号060203）。卵蛋白(OVA)、 IFNγ放免试剂盒, 为上海升正生物技术有限公司产品; IL4、 IgE放免试剂盒, 为北京生物博大泰克生物技术有限公司产品; S888E型超声雾化仪由中外合资南京道芬电子有限公司产品; FJ2021型γ放射免疫计数器由西安二六二厂生产。 　　1.2 方法 　　1.2.1 分组、 造模与给药 将40只Wistar大鼠随机分为5组: 空白对照组、 模型组、 哮喘灵大、 小剂量组及阳性对照组(蛤蚧定喘胶囊)。除空白对照组外其余4组均采用Ikeda 等法[4]造模, 并作改进: 每只大鼠自第1天起腹腔注射由（OVA 10 mg加氢氧化铝干粉100 mg与灭活百日咳菌苗5×109个）配制成的混悬液1 mL进行致敏, 于第8天重复1次以加强致敏。第15天将致敏的大鼠置于15 L密闭玻璃容器内, 给予10 g/L OVA生理盐水超声雾化吸入加以激发, 每天1次, 每次30 min, 待出现张口呼吸, 节律不整, 腹式呼吸明显, 呼吸频率加快且不齐, 喷嚏或呛咳, 口鼻、 四肢及尾尖轻度紫绀, 粪便增多, 反应迟钝, 活动明显减少等症状时为引喘成功。其中各给药组于每天激发前12 h分别超声雾化吸入哮喘灵药液(13.92 g/kg、 27.84 g/kg)及蛤蚧定喘胶囊(0.6 g/kg, 用0.03 L生理盐水加以稀释）; 空白对照组以等量生理盐水进行腹腔注射和雾化, 方法同上。 　　1.2.2 观察项目 治疗过程中观察各组哮喘大鼠饮食、 体质量, 毛色等哮喘症状的变化, 且统计各组大鼠引喘潜伏期的变化情况。 　　1.2.3 检测指标 实验第22天, 各组大鼠末次激发2 h后, 以30 g/L的戊巴比妥钠45 mg/kg腹腔注射麻醉各组大鼠于股动脉采血, 并分离血清。严格按照试剂盒说明采用放射免疫法测定哮喘大鼠血清中IFNγ、 IL4及IgE的含量, 并计算IFNγ/IL4的比值。 　　1.2.4 统计学处理 采用SPSS11.5统计软件进行组间单因素方差分析, Plt;0.05为有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 各组大鼠症状及引喘潜伏期变化结果 各组大鼠激发前一般状态良好。空白组大鼠激发前后无明显变化; 模型组哮喘各症状进一步加重; 哮喘灵大小剂量组及阳性对照组与模型组比较, 哮喘症状明显减轻, 引喘潜伏期均明显延长, 差异有统计学意义（Plt;0.01, 表1）。 　　表1 哮喘灵气雾剂对各组大鼠引喘潜伏期的影响（略） 　　bPlt;0.01 vs 模型组. 　　2.2 哮喘灵对哮喘大鼠血清中IFNγ、 IL4及IgE水平的影响 模型组较空白组IFNγ降低, IL4、 IgE升高; 哮喘灵大剂量组