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喉癌组织中核转录因子NFkB定量检测 　【摘要】 探讨核转录因子(nuclear transcription factor kappa B, NFkB)的定量检测在喉癌组织中的意义。 方法 ：采用蛋白质印迹杂交法（Western blot法）和凝胶电泳迁移率（EMSA）法对20例喉癌组织和10例癌旁正常组织中NFkB的蛋白含量以及NFkB DNA结合活性进行定量检测，并进行 分析 比较。 结果：喉癌组织中NFkB的蛋白含量以及NFkB DNA结合活性均明显高于癌旁正常组织，差异有统计学意义（Plt;0.05）。结论：NFkB在喉癌的发生 发展 过程中可能起一定的作用，并为喉癌的 治疗 能提供一个新靶点。 毕业论文 【关键词】 喉肿瘤 核转录因子 蛋白质印迹杂交 凝胶电泳迁移率 A A quantitative analysis of NFkB in laryngeal carcinoma ［ABSTRACT］ Objective: To explore the significance of the quantitative analysis of NFkB in laryngeal carcinoma tissues. Methods: The quantitative analysis of the protEin content and the DNA binding activity of NFkB was examined by the Western blot method and electrophoretic mobility shift assay (EMSA) method in 20 cases of laryngeal carcinoma tissues and 10 cases of normal pericarcinoma tissues. Results: The protEIn content and the DNA binding activity of NFkB in laryngeal carcinoma tissues were higher than those in pericarcinoma normal tissues（Plt;0.05）. Conclusion: The NFkB might play an important role in the occurrence and development of laryngeal carcinoma and offers a new target of laryngeal carcinoma treatment. 毕业论文 ［KEY WORDS］ Laryngeal neoplasms; Nuclear transcription factor kappa B; Western blot; Electrophoretic mobility shift assay (EMSA) 核转录因子（NFkB）广泛存在于真核细胞中，通过调控众多下游基因的转录来参与机体的免疫应答、炎症反应、细胞凋亡和肿瘤形成过程。近年有很多 研究 报道NFkB在大肠癌、宫颈癌、肺癌、肝癌等组织中有较强的表达，而在喉癌组织中较少，且仅为免疫组化的定性分析。我们 应用 蛋白质印迹杂交法（Western blot法）和凝胶电泳迁移率（EMSA）法定量检测了20例喉癌组织中NFkB的表达情况，现报道如下。 论文代写 1 资料与方法 论文代写 1.1 材料来源 20例喉癌组织标本均从2002年7月至2003年12月重庆医科大学附属第一 医院 第一 次住院的喉癌患者中获得，无放化疗史，均为非转移性；术前及术后病理检查证实均为喉鳞状细胞癌；所有标本手术切除后3?min内采集，同时术中切取10例癌旁组织作为喉正常组织作对照（实验前病理证实为正常组织），采集后将标本置于-70?℃液氮保存备用。 1.2 试剂 NFkB P65抗体（一抗）和Western blot luminol reagent 购自美国satus cruzs公司;辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG（二抗）购自北京中山公司;T4多核苷酸激酶和NFkB探针（5′AGTTGAGGGGACTTTCCCAGGC3′, 3′TCAACTCCCCTGAAAGGGTCCG5′）购自美国Promega公司;［r32p］ATP购自北京亚辉公司。 论文代写 1.3 方法 毕业论文 1．3．1 蛋白质印迹杂交法（Western blot法） 精确称取备用的喉癌和正常组织0.1?g经匀浆离心后取上清液，考马斯亮蓝G25