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哈萨克族人群DNA损伤修复基因hOGG1多态性探究 　【摘要】 目的 研究新疆哈萨克族人群DNA氧化性损伤遗传易感性。方法 采用PCR-RFLP技术，对200名正常的哈萨克人进行hOGG1基因326位点Ser/Cys多态性分析。结果 人群中Ser/Ser、 Ser/Cys、 Cys/Cy基因型频率分别为0.49、0.34、0.17，跟以往研究中的中国人、日本人、韩国人人群中的基因分布相似，但与其他的高加索人群中的基因分布有很大的差别；并且发现吸烟者中的Cys/Cy基因的频率几乎是不吸烟者的4倍,两组之间各等位基因频率差异有显著性（Plt;0.05）。结论 本研究的结果表明哈萨克族DNA修复基因hOGG1多态性与吸烟相关。 【关键词】 吸烟 hOGG1 多态性 哈萨克族人群 肿瘤易感性 【Abstract】 Ojbective To study the polymorphism distribution of Ser326Cys on hOGG1 gene in hazakh population. Methods Ser326Cys polymorphism analysis on hOGG1 gene was determined by PCR-RFLP on 200 normal hazakh subjects. Results The frequencies of the allelic gene Ser/Ser, Ser/Cys, Cys/Cy were 0.49, 0.34, 0.17 respectively. The results were similar to those studied previously in Chinese and Japansese populations,but were different from those in Caucasian populations. The frequency of the allelic gene Cys/Cys in the smokers was higher than that in the nonsmokers（Plt;0.05）. Conclusion The results of the study suggest that the polymorphism of DNA repair gene hOGG1 is associated with smoking. 【Key words】 smoking; hOGG1; polymorphism; hazakh population; cancer susceptibility 吸烟是癌症，特别是肺癌、食管癌发生的重要危险因素，家族研究表明遗传易感性起重要作用，DNA修复能力下降的个体发生癌症的危险性增加。DNA中的鸟嘌呤残基受到攻击后，产生8-羟基鸟嘌呤（8-OHdG），它可以导致DNA链空间构象的改变，在DNA复制时引起G：C→T：A颠换［1］。人类8-羟基鸟嘌呤糖苷酶（human 8-hydroxygumine glycosylase, hOGG1）是一种DNA修复酶，可以特异切除8-羟基鸟嘌呤，对损伤了的DNA进行还原修复［2,3］。 研究发现，在hOGG1基因中326密码子处的Ser/Cys多态性与其编码的酶活性密切相关。近年来，国内外已经有人开始研究hOGG1基因多态性与各种肿瘤或者疾病的关系［4～6］，但是还没有哈萨克族人群中hOGG1基因多态性研究的报道，而哈萨克人群中食管癌高发。鉴于此，我们初步探索了哈萨克族人群中的hOGG1基因多态性与吸烟的关系。 1 材料与方法 在收集前进行一项问卷调查，如发现个体有肿瘤、重大疾患或者家族遗传性肿瘤史等情况，将会被排除在研究之外。共收集200名健康的、无任何血缘关系的新疆哈萨克族个体的2ml静脉血，放置于EDTA抗凝管中，用Takara DNA提取试剂盒提取DNA，于-20℃保存。用PCR-RFLP方法对hOGG1 的Ser326Cys基因型进行分析，引物为5′-ACTGTCACTAGTCTCACCAG-3′和5′-GGAAGGTGCTTGGGGAAT-3′，反应体系为50μl，含有2μl已提取的DNA作为模板，10×buffer 5μl(Mg2+ 包括在内)，dNTP混合物8μl, 引物各1μl(20pmol/μl )，TaqDNA聚合酶0.5μl(Takara，Japan )。反应混合物先在94℃预热5min，然后在94℃40s，55℃40s，72℃40s的条件下进行35个循环，再在72℃下延伸10min。PCR产物用Fnu4HI限制性内切酶（Fenmentas）在37℃下切割16h，用2%的琼脂糖凝胶电泳分离酶切片