均匀设计法优化珍珠草中总多酚超声波提取工艺探究.docVIP

均匀设计法优化珍珠草中总多酚超声波提取工艺探究 　【摘要】 目的为充分利用大戟科珍珠草资源，优选珍珠草有效成分总多酚的提取工艺。方法以总多酚含量考察为指标，使用超声波进行提取，采用均匀设计法对工艺条件进行优化，普鲁士蓝法进行总多酚含量测定。结果总多酚最佳提取工艺：乙醇浓度10%，提取时间90 min，液料比为10，超声功率200 W。结论该方法简单可行，可作为珍珠草总多酚的提取工艺。 【关键词】 珍珠草; 总多酚; 超声波提取; 均匀设计 　　Abstract：ObjectiveTo study an extraction technology for total polyphenols from Pearl grass of Euphorbiaceae. MethodsThe total polyphenol was extracted with ultrasonic wave, the extraction conditions were optimized by equality design and the content was determined by Prussian blue method.ResultsThe optimum process of the extraction technology was ethano1 10%, time 90 minutes, the ratio of material to liquid 10 and ultrasonic power 200W.ConclusionThe method is simple and feasible, and can be used as the extraction process of total polyphenol from Pearl grass. 　　Key words：Pearl grass; Total polyphenols; Ultrasonic extraction; Equality design 　　珍珠草，又名叶下珠，大戟科草本植物，全草入药，具有清热、解毒、明目等功效。民间常用于治疗黄疸、肝炎、痢疾等疾病，现代药理实验证明珍珠草具有极强的抗乙肝病毒和保肝作用[1，2]。亚洲循症医学研究中心研究通过体外试验研究证明珍珠草是最为优秀的抗病毒中药之一[3]。2002-06由国内四十多位肝病专家参与编写的《病毒性肝炎》，评价珍珠草是“目前抗乙肝病毒研究最多，最有希望的药用植物”[4]。2002-08广西医科大学完成“抗乙肝表面抗原中草药的筛选”工作，对200种中药进行体外、体内研究证实，只有珍珠草和五倍子对乙肝表面抗原有效[5]。珍珠草中所含的没食子酸(gallic acid)、短叶苏木酚酸(brevifolincarboxylic acid)和鞣云实精(corilagin)等多酚类化合物是其主要有效成分。对珍珠草有效成分多酚的提取工艺文献鲜见报道，故有必要对之进行研究。本实验采用乙醇作为溶剂、超声波提取，利用均匀设计的试验方法对珍珠草中的总多酚进行提取，并优选出最佳提取工艺。 　　1 仪器与材料 　　1.1 仪器KQ-500DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);UV-2800A型紫外可见分光光度计(Unico尤尼柯(上海)仪器有限公司);T-500型电子天平(美国双杰(基团)有限公司，常熟双杰测试仪器厂);旋转蒸发器RE-52A(上海亚荣生化仪器厂)。 　　1.2 材料没食子酸标准品(天津市大茂化学试剂厂);珍珠草，购自广西药材站;实验所用试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 方法采用普鲁士蓝方法[6]测定了叶下珠中总多酚的含量。其反应原理为酚羟基具有还原性，能将Fe(CN)63-还原成Fe(CN)64-，还原产物Fe(CN)64-接着与Fe3+反应生成Fe[Fe(CN)6]3(普鲁士蓝)供定量测定。 　　2.1.1 对照品溶液的制备精密称取没食子酸对照品25 mg置于50 ml容量瓶中,30%甲醇水溶解并加至刻度, 得到0.5 mg/ml的对照品溶液。精密吸取该溶液1 ml置于10 ml容量瓶中, 加入30%甲醇水至刻度, 配成50 μg/ml对照品溶液。 　　2.1.2 供试品溶液的制备取珍珠草提取物0.1g, 精密称量, 加入40 ml 30%甲醇水, 置水浴中微沸浸提15 min后, 趁热抽滤, 冷却后定容至100 ml。 　　2.1.3 标准曲线的制备精密吸取上述对照品溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ml置于25 ml 容量瓶中, 依次加入0.100 mol/L 三氯化铁溶液0.5 ml，0.008 mol/L铁氰化钾溶液0.5 ml和0.10 mol/L 盐酸溶液