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均匀设计法优化超声波提取茯苓多糖工艺条件探究 　 作者：赵子剑， 陈迪钊，连琰， 赵永新 【摘要】 　　目的优选超声波提取茯苓多糖工艺参数。方法以茯苓多糖为评价指标，采用均匀设计实验对超声波提取茯苓多糖提取工艺进行优选。结果最佳提取工艺条件为：溶剂70%的乙醇，料液比为1∶10，温度25℃，提取20 min。结论优选出的工艺科学合理。 【关键词】 茯苓； 超声波提取； 均匀设计 　　Abstract：ObjectiveTo optimize the supersonic extraction process of pachyman in Poriacocos(Schw.) Wolf. MethodsThe Uniform design was used to optimize supersonic extraction process of pachyman in Poriacocos(Schw.) Wolf with the rate of pachyman in Poriacocos(Schw.) Wolf. ResultsThe optimal extracting procedure was as follows: the extraction solvent was 40% ethanol,feed ratio was 1：10,the extraction temperature was 25℃and the extraction time was 20 min. ConclusionThe optimum extracting procedure is reasonable and stable. 　　Key words：Poriacocos(Schw.) Wolf ； Supersonic Extraction； Uniform design 　　茯苓为多孔菌科真菌茯苓Poriacocos (Schw.) Wolf的干燥菌核，其性味甘、淡、平，归脾胃肺肾经，有利水渗湿、益脾宁心之功效。主治气虚劳伤、水肿、痰饮、呕吐、腹泻、热淋、遗精、惊悸、健忘等证。茯苓多糖是茯苓的有效部位之一，为灰白色粉末，味微咸，无臭，略有吸湿性。具有抗肿瘤、提高机体免疫力、保肝与催眠、抗衰老、抗单纯疱疹病毒、防石、消石、抗炎等作用［1］。为了更好地利用茯苓，提高茯苓多糖的收率，本研究采用了均匀设计法进行茯苓多糖超声提取工艺研究，以筛选茯苓多糖超声提取的最佳工艺条件。 　　1 器材及药品 　　茯苓(湖南靖州)。KQ-100DB型数控超声波清洗器（昆山超声仪器有限公司），紫外分光光度计（UV-2501，日本 岛津)，电子分析天平。葡萄糖标准品(供含量测定用，批号110833-200503，中国药品生物制品检验所)，苯酚，浓硫酸和铝片等。 　　2 方法 　　2.1 药材粉碎度的选择　超声波提取中，物料的粒度对提取效率有较大的影响，通常不同质地的物料需选择不同的粒度，才能保证较佳的提取效率。参照文献条件，取不同粒度茯苓药材，在乙醇浓度50%，提取温度45℃条件下超声提取20 min，考察粒度对茯苓多糖得率的影响。结果见表1。 　　表1 药材粒度对多糖得率的影响（略） 　　实验结果表明，药材粒度为20～60目时，提取时提取率较好。 　　2.2 提取次数的选择 取20～60目粒度茯苓药材，在乙醇浓度50%，提取温度45℃，提取时间20 min条件下，分别提取1，2，3次，考察提取次数对茯苓多糖得率的影响。结果见表2。 　　表2 提取次数对多糖得率的影响（略） 　　结果表明，超声波提取1次后，茯苓多糖即已提取完全。 　　2.3 茯苓提取物中多糖含量的测定方法 　　2.3.1 4%苯酚溶液的配制取苯酚100 g，加铝片0.1 g和碳酸氢钠0.05 g，蒸馏并收集182 ℃馏分，称取4 g，在100 ml容量瓶加水溶解至刻度线，然后放冰箱内冷藏备用(一定要在182℃时收集其馏分)。在蒸馏过程中，还要控制好冷凝程度，若冷凝管内的水流量过快，则会很快使其中的馏分结晶而影响到馏分的正常收集。 　　2.3.2 制备标准曲线精密称取置五氧化二磷减压干燥器中干燥12 h以上的无水葡萄糖标准品15 mg，置25 ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀置室温下（约24℃）备用（浓度为0.6 mg/ml）。精密量取对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml，分别置于100 ml容量瓶中，并加水至刻度，摇匀。精密量取上述各溶液2 ml，置具塞试管中，分别加入4%的苯酚溶液1 ml，混匀后迅速加入浓硫酸7.0 ml，摇匀，并于45℃水浴中保温30 min后取出，置冰水浴中5 min后取出。然后以第1份为空白对照组，用分光光度法在490 nm的波