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大孔树脂分离丹参酚酸B筛选探究 　【关键词】 丹酚酸B；,,高效液相色谱法；,,大孔树脂 论文代写 　　摘要：目的筛选分离丹酚酸B的最佳大孔树脂。 方法 以高效液相色谱（HPLC）测得丹酚酸B含量为指标，对10种不同型号的树脂分别进行吸附与解吸性能考察。结果大孔树脂的吸附与解吸性能有较大差异，HPD450，D101，X5，HPD800，D4020，HPD700对丹酚酸B均有较强的吸附与可洗脱性，D101为最佳吸附树脂。结论 大孔树脂分离丹酚酸B方法是可行的。 　　关键词：丹酚酸B； 高效液相色谱法； 大孔树脂 　　丹酚酸（salvianolic acids）是中药丹参Salvia miliiorrhiza Bge.中的主要活性成分，具有抗动脉粥样硬化、保护心肌细胞、防心脑缺血损伤、抗血小板凝聚、抗肝纤维化、改善记忆、抗肿瘤等作用［1，2］。丹参药材中水溶性成分提取，多以丹参素或原儿茶醛为指标［3，4］，但两者在药材中的含量均较低，只有丹酚酸B为丹酚酸中最主要的有效成分［5］。 目前 对丹酚酸分离多采用醋酸乙酯萃取法，但该种方法溶剂消耗大，并存在溶剂残留。大孔树脂吸附是目前用于许多有效成分分离的良好方法，成本低、效率高，但至今尚无筛选大孔树脂分离丹酚酸B的报道。本人就大孔树脂对丹参酚酸B的吸附与解吸性能进行综合考察，以期找到一种分离丹参酚酸B的最佳大孔树脂。 　　1 材料与仪器 　　1.1 材料与试药 　　丹参药材，湖北产，60℃减压干燥后，粉碎过40目筛。大孔树脂：HPD450（弱极性）、HPD600（极性）、HPD700（非极性）、HPD800（中极性）（河北沧州宝恩化工有限公司）、D101（非极性）（天津海光化工有限公司）、D4020（非极性）、AB8（弱极性）、X5（非极性）、S-8（极性）、NKA9（极性）（南开大学化工厂）。乙腈为色谱纯；甲醇、甲酸为 分析 醇；丹酚酸B对照品（ 中国 药检所，批。 　　1.2 仪器 分离色谱柱（20 mm×500 mm）；Agilent 1100高效液相色谱仪，紫外检测器，色谱柱Kromasil C18(250 mm×4.6 mm)/5μm。 　　2 方法 　　2.1 丹参提取液的制备 丹参药材粉，加10倍量70%乙醇50℃浸提1 h，过滤后滤渣再加8倍量70%乙醇50℃浸提30 min，合并滤液，减压浓缩至原体积的1/3，用10%HCl调pH至3.0，静置，离心去沉淀（4 000 r#12539;min1）。保留上清液，并测定其中的丹酚酸B含量。 毕业论文 　　2.2 大孔树脂吸附 各种大孔树脂经乙醇、5%盐酸和5%氢氧化钠顺序浸泡3~5 h后，以水洗至pH中性。量取丹参提取液100 ml各10份，分别加入HPD450，HPD600，HPD700，HPD800，D101，D4020，AB8，X5，S8，NKA9树脂10 g，静态吸附24 h。过滤，滤液测定丹酚酸B含量， 计算 吸附率。 论文代写 　　2.3 树脂解吸吸附后的树脂，分别用水、30%，50%，70%乙醇各100 ml淋洗，收集淋洗液，测定丹酚酸B含量，计算各溶液解吸率。解吸率为解吸量占吸附量的百分率。 　　　2.4 丹酚酸B的含量测定 　　采用高效液相色谱法。流动相：乙腈∶甲醇∶水∶甲酸（20∶55∶24∶1），柱温30℃, 进样量10 μl，流速1 ml#12539;min1，运行时间20 min，检测波长276 nm。丹酚酸B的保留时间为15.3 min，分离度大于2.0， 理论 塔板数不低于5 000。 　　.4.1 标准曲线制备 　　精密称定丹酚酸B对照品23 mg，水溶解并定容50 ml。分别吸取对照液0，0.31，0.62，1.25，2.5，5，10 ml，加水定容至10 ml，分别得到0，0.014 4，0.028 8，0.057 5，0.115，0.230，0.460 mg#12539;ml1对照液梯度，进样高效液相色谱仪。以峰面积X为横坐标，浓度Y为纵坐标，绘制标准曲线。Y=0.000 106X+0.005 464，r=0.999 9。表明丹酚酸B在0~0.460 mg#12539;ml1范围内具有良好的线性关系。 　　2.4.2 样品测定吸取样液2 ml，加水溶解并定容至100 ml。过滤，滤液过0.45 μm微孔滤膜，进样高效液相色谱仪，按标准曲线制作 方法 测定峰面积， 计算 样液的丹酚酸B含量。 　　3 结果 　　3.1 各种树脂对丹酚酸B的吸附性能比较 经测定，丹参提取液的丹酚酸浓度为 24.056 mg#12539;ml1，各种树脂对其均有吸附，吸附率均在70