大蓟总黄酮对荷瘤小鼠白细胞介素1及白细胞介素2影响.docVIP

大蓟总黄酮对荷瘤小鼠白细胞介素1及白细胞介素2影响 　 作者：刘素君 周泽斌，胡霞，张杰 【摘要】 　目的在分子水平上探讨大蓟总黄酮的抗肿瘤机制，主要研究大蓟总黄酮对荷瘤小鼠白介素1（IL1）和白介素2（IL2）的影响。方法通过RT-PCR方法半定量检测肿瘤小鼠细胞产生IL1 mRNA和IL2 mRNA的量来研究大蓟总黄酮能否促进肿瘤小鼠细胞产生IL1 mRNA和IL2 mRNA。结果大蓟总黄酮能够极为显著地提高肿瘤小鼠细胞产生IL1和IL2的转录水平（Plt;0.01）。结论 大蓟总黄酮能明显地促进肿瘤小鼠IL1和IL2 mRNA的表达。 【关键词】 大蓟总黄酮 白细胞介素 1 白细胞介素 2 　　Abstract:ObjectivEin order to further exploit the anti-tumor mechanism of total flavones in Cirsium japonicum DC at molecular level, the effects of the total flavones on the interleukin 1（IL1） and interleukin 2（IL2） in the tumor-bearing mice were studied. MethodsThe IL1mRNA and IL-2mRNA detected in the spleen cells and abdominal cells of the tumor-bearing mice by highly sensitive RT-PCR technology. ResultsThe total flavones in Cirsium japonicum DC could enhance the expression of IL1 and IL2 mRNA（Plt;0.01）.ConclusionThis study suggested that the total flavones in Cirsium japonicum DC can enhance the expression of IL1 and IL2 mRNA. 论文代写 　　Key words:The total flavones in Cirsium japonicum DC； IL1； IL2 　　大蓟为菊科管状花亚科菜蓟族蓟属植物Cirsium jiaponicum DC.的干燥地上部分或根［1］，我国各地均产。大蓟性凉，味甘、苦，归心、肝经，功效为凉血止血、祛淤止痛。大蓟的主要成分为黄酮类化合物， 文献 报道其多聚乙炔具有抗肿瘤作用［2］。其总黄酮在体内有抗肿瘤作用并能提高肿瘤小鼠的免疫功能［3］。 　　细胞因子是具有免疫调节作用的一类重要蛋白质物质。许多中药可以通过激活单核巨噬细胞系统，诱生多种细胞因子(如促进干扰素生成，促进白细胞介素生成，诱生肿瘤坏死因子等)来增强动物免疫功能。白细胞介素(IL)能活化B细胞、巨噬细胞、NK细胞,近年来研究发现许多中药都有促进细胞因子产生的作用。例如枸杞子能促进老年小鼠产生IL-2；中华猕猴桃提取物能使小鼠脾细胞培养上清液中IL-2活性明显升高；黄芪多糖能使大黄脾虚模型小鼠低下的IL-2活性升高，而对正常小鼠无影响；青蒿素抑制IL-2的产生；银耳多糖高浓度时则降低小鼠脾细胞培养液中的IL-2的活性［4］。一般来说，细胞中某种mRNA的数量是其编码基因活性的直接反映。所以某种mRNA的定量是随着在不同的时空状态下编码基因表达活性的变化而有所不同。RTPCR具有很高的敏感性［5，6］，可以用来分析不同的组织、或相同组织不同发育阶段中mRNA表达状况的相关性。 　　 1 器材与方法 　　1.1 供试动物 论文代写 　　昆明种标准小鼠，体重（21±2）g，雌雄各半，由四川中药研究所提供BalB/C纯种小鼠，体重（20±2）g，雌雄各半，由成都中医药大学动物中心提供C57BL/6J纯种小鼠，体重（20±2）g，雌雄各半，由成都中医药大学动物中心提供。 论文代写 　　1.2 大蓟总黄酮的制备 　　将大蓟70%乙醇提取物与硅藻土拌样挥干后,装入玻璃管柱中，用石油醚流洗,去除其中的叶绿素和极性较小的成分；流洗结束后倒出硅藻土化合物，挥干溶剂重新装入玻璃管柱，正丁醇流洗提取，用1%三氯化铝乙醇溶液与黄酮类化合物在滤纸上显色后，在紫外灯下观察有无黄绿色荧光的方法检测监控，提取至流洗液无黄酮反应时结束；将正丁醇提取液浓缩后挥干溶剂，用少量95%的乙醇溶解后上聚酰胺树脂柱，依次用水和95%的乙