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大蝎子草抗炎镇痛活性部位探究 　 作者：陶玲，支娜，柏帅，杨如会，沈祥春 【摘要】 　　目的研究大蝎子草抗炎镇痛的活性作用部位，为进一步寻找活性成分奠定基础。方法采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀及皮肤毛细血管通透性实验、醋酸致小鼠扭体反应与小鼠热板致痛等实验动物模型进行整体动物生物活性评价。结果大蝎子草提取物水层、醋酸乙酯层和氯仿层能够显著减少醋酸致小鼠扭体次数，延长热板痛反应时间，水层还能显著抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀及皮肤毛细血管通透性增高，与对照组比较均有显著性差异。结论大蝎子草提取物水层有较好的抗炎镇痛作用， 醋酸乙酯层和氯仿层具有镇痛作用，为活性成分的寻找提供了研究基础和方向。 【关键词】 大蝎子草 抗炎 镇痛 　　活麻药用历史悠久，在《楚彝本草》《滇药录》《藏本草》等均有记载，主要用于治疗中风不语，咳嗽多痰、风湿疼痛、跌打损伤、骨折等。根据文献资料我国大部分地区所用活麻为荨麻科荨麻属的植物，因此，目前国内外在荨麻属药用植物的活性研究较多，由于其明确的疗效，引起相关科研人员的日益重视［1］。 　　活麻作为治疗药物以红禾麻药名被2003版《贵州省中药材、民族药材质量标准》收录，该标准收载的活麻原植物为荨麻科珠牙艾麻Laportea bulbifera (Sieb. et Zucc.) Wedd.的新鲜或干燥全草［2］。我们经过广泛的调查，贵州不少民族地区以荨麻科蝎子草属植物大蝎子草Girardinia diversifolia (Link) Friis的全草或根作为活麻药材广泛使用，而目前对该植物的相关研究未见报道。为促进植物资源的合理开发和利用，本研究以大蝎子草Girardinia diversifolia (Link) Friis为研究对象，按照传统部位分离的方法，采用经典抗炎镇痛模型研究其活性部位，为进一步指导大蝎子草的研究开发提供实验依据。 　　1 材料 　　1.1 药材与药物制备 　　大蝎子草，采集于贵州省贵阳市花溪区，经贵阳医学院龙庆德老师鉴定为蝎子草属植物大蝎子草Girardinia diversifolia (Link) Friis的地上部分，药材标本留于贵阳医学院药学院药用植物学和生药学教研室。药材经低温干燥后，取1 kg 加入95%乙醇8 L进行提取，回流提取3次，抽滤，合并滤液在旋转蒸发仪上进行浓缩，浓缩液依次经石油醚、醋酸乙酯、氯仿萃取，分别得到各部位萃取物21.4，3.2，1.0 g和剩余水层34.8 g。 　　1.2 试剂阿司匹林，中国医药公司上海分公司产品（批号840130）；醋酸，上海申博化工有限公司产品，AR（批号0501101）；甲酰胺，天津市科密欧化学试剂开发中心产品，AR（批；二甲苯，重庆川江化学试剂厂产品，AR（批；伊文思蓝，中国医药集团上海化学试剂公司进口分装（批号；氯化钠，重庆川江化学试剂厂产品，AR（批。 　　1.3 动物昆明种小鼠，♀♂兼有，体重18～22 g，由贵阳医学院动物实验中心提供［动物合格证号：SCXK（黔）2002-0001］。 　　1.4 仪器BS223S型分析天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司产品； HH-601超级恒温水浴锅，江苏金坛市环宇科学仪器厂产品；GJ28402型热板测痛仪，浙江宁海白石电子医药仪器厂产品；722光栅分光光度计，上海第三分析仪器厂产品。 　　2 方法 　　2.1 抗炎实验 　　2.1.1 对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 　　参照文献方法［3］，选取体重（20 ±2）g小鼠 60只，随机分为6组，即模型组、阿司匹林组（300mg/kg）、大蝎子草石油醚部位（103mg/kg）、氯仿部位(16 mg/kg)、醋酸乙酯部位（5 mg/kg）及水层（174 mg/kg）。各给药组均相当于大蝎子草生药剂量为 5g/kg，每组10 只小鼠，给药容积为10 ml/kg，连续给药5d，末次给药40 min后，于小鼠右耳(两面)均匀涂抹二甲苯20 μl/只致炎，左耳不涂，同时立即尾静脉注射1%伊文思蓝 0.1 ml/10 g。20 min后将小鼠颈椎脱臼处死，用直径为 8 mm的打孔器沿左右耳片同一部位打下圆耳片，在电子天平上称重，右耳与左耳重量之差即为肿胀度。并计算肿胀抑制率，肿胀抑制率（%）=（模型组平均肿胀度-给药组平均肿胀度）/模型组平均肿胀度×100%。 　　2.1.2 伊文思蓝标准曲线的的制作［4］ 　　精密称取伊文思蓝粉末 0.010 g，置于100 ml容量瓶中，用甲酰胺溶解并定容，配成100 μg·ml-1溶液，在分别精密吸取 0.25，0.5，1，2，4，6，8 ml该溶液于10 ml容量瓶中并再次用甲酰胺定容，以620 nm波长，1 cm光径测定其吸